Основа дифференциального агара для листерий HiMedia M1540I-500G (500 г)

Основа дифференциального агара для листерий HiMedia M1540I-500G (500 г) производства HiMedia — сухая порошкообразная среда для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes. Применяется при анализе пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды в пищевом производстве; дифференциация основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC).

Назначение и область применения

Среда рекомендована для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes. Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 11290-1:2017 и ISO 11290-2:2017.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые продукты.
• Корма для животных.
• Образцы окружающей среды в зонах производства и обращения пищевых продуктов.

Принцип дифференциации

Listeria monocytogenes — грамположительный патоген человека, передающийся через пищевые продукты и способный вызывать тяжёлые инфекции у беременных женщин, включая самопроизвольный аборт, мертворождение, неонатальный листериоз и менингит, а также первичную бактериемию у взрослых и детей. Патогенность Listeria ivanovii для человека остаётся неопределённой.

L. monocytogenes и L. innocua обладают сходными биохимическими свойствами, поэтому не могут быть дифференцированы на традиционных средах PALCAM и Oxford. Среда основана на рецептуре Ottaviani и Agosti для селективного и дифференциального выделения L. monocytogenes из пищевых продуктов и кормов для животных; эта рецептура принята комитетом ISO. Метод также рекомендован APHA и FDA-BAM.

• Пептон HM, триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами.
• Пируват натрия обеспечивает дополнительные питательные вещества, необходимые для роста.
• Глюкоза (декстроза) является сбраживаемым углеводом.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Фосфат выполняет буферную функцию.
• Хлорид лития и селективные добавки FD212A подавляют сопутствующую микрофлору и обеспечивают рост видов Listeria.
• Виды Listeria гидролизуют хромогенный субстрат 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкопиранозид с образованием колоний синего или зелёного цвета.
• Дифференциация L. monocytogenes от других видов Listeria основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC).
• Фермент фосфолипаза C гидролизует очищенный субстрат FD214, добавленный в среду, в результате чего вокруг колоний L. monocytogenes образуется непрозрачный ореол.

Состав

M1540I — основа агара HiCrome® Listeria Ottaviani-Agosti

Содержание компонентов приведено в г/л.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

• # — эквивалент ферментативного переваривания тканей животного происхождения.
• ## — эквивалент ферментативного переваривания казеина.

Добавки после автоклавирования

FD212A — 2 флакона: селективная добавка OA

FD214 — 2 флакона: добавка для обогащения LP 1

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,02 г порошка в 465 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление 15 фунтов приблизительно соответствует 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное содержимое 1 флакона добавки для обогащения LP 1 (FD214).
6. Добавьте стерильное регидратированное содержимое селективной добавки OA (FD212A).
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Сбор и обращение с образцами

При работе с пищевыми продуктами, кормами для животных и образцами окружающей среды применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды.
• Наименование среды: HiCrome® Listeria Ottaviani-Agosti Agar Base.
• Артикул: M1540I.
• Масса: 500 г.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности).
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH по контролю качества: 7,00–7,40.
• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Режим автоклавирования: 121 °C, 15 мин.
• Температура охлаждения перед внесением добавок: 45–50 °C.
• Масса порошка для приготовления: 36,02 г.
• Объём очищенной или дистиллированной воды: 465 мл.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета с опалесценцией.

Реакция

Реакция 7,2%-ного водного раствора, измеренная при 25 °C.

pH

7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Показатели продуктивности, специфичности и селективности определяют после добавления стерильных селективной добавки OA (FD212A) и добавки для обогащения LP 1 (FD214) с последующей инкубацией при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.

Для оценки продуктивности коэффициент восстановления принимают за 100 % при росте бактерий на эталонной среде — агаре с перевариванием казеина соевых бобов, также называемом триптон-соевым агаром. Х