Основа дифференциального агара для листерий HiMedia M1540I-500G (500 г)

Основа дифференциального агара для листерий HiMedia M1540I-500G (500 г) предназначена для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандартов ISO 11290-1:2017 и ISO 11290-2:2017.

Принцип измерения

Среда основана на рецептуре Ottaviani и Agosti и предназначена для выделения L. monocytogenes из пищевых продуктов и кормов для животных.

• Питательная база: пептон HM, триптон и экстракт дрожжей обеспечивают азотистые и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые питательные вещества. Пируват натрия служит дополнительным источником питания для роста.
• Селективность: хлорид лития и селективные добавки (FD212A) подавляют рост сопутствующей микрофлоры, позволяя расти видам Listeria.
• Дифференциация: виды Listeria гидролизируют хромогенный субстрат (5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид), что приводит к образованию колоний синего или зеленого цвета. Отличие L. monocytogenes от других видов Listeria основано на активности фосфолипазы C, специфичной к фосфатидилинозитолу (PIPLC). Фермент PIPLC гидролизует очищенный субстрат (FD214), что вызывает появление матового (непрозрачного) ореола вокруг колоний L. monocytogenes.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 36,02 г порошка в 465 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить стерильное содержимое 1 флакона добавки LP Enrichment Supplement 1 (FD214) и стерильное регидратированное содержимое селективной добавки OA Selective Supplement (FD212A).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Сбор и обработка образцов

Применяется для анализа пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды в зонах производства и переработки пищевой продукции. Сбор образцов осуществляется согласно установленным руководствам (ISO, APHA, FDA-BAM). После использования загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав основы (M1540I)

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2.

Селективные добавки (вводятся после автоклавирования)

OA Selective Supplement (FD212A) — 2 флакона

LP Enrichment Supplement 1 (FD214) — 2 флакона

Общие параметры

Ограничения применения

1. Некоторые штаммы L. monocytogenes, подвергшиеся стрессу (особенно кислотному), могут иметь очень слабый ореол или не иметь его вовсе.
2. Для дифференциации между L. monocytogenes и L. ivanovii требуются дополнительные биохимические тесты, так как оба вида проявляют активность PIPLC (матовый ореол).
3. Некоторые микроорганизмы, не относящиеся к Listeria spp., могут образовывать синие колонии; для идентификации необходима биохимическая характеристика.
4. Для окончательного подтверждения требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определяются при использовании стерильных добавок FD212A и FD214 после инкубации при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч. Степень восстановления считается 100 % при росте на референсном сое-казеиновом дигест-агаре (Tryptone Soya Agar).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. Используйте защитные перчатки, спецодежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. Утилизация использованных или непригодных препаратов должна осуществляться путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.