HiMedia M1540I-1KT HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости

HiMedia·Арт.: 0049247·Арт. произв.: M1540I-1KT

HiMedia M1540I-1KT HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости

Name: HiMedia M1540I-1KT HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости
Brand: HiMedia
SKU: 0049247
Price: 26021 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ26 021 руб.

Хромогенный селективный дифференциальный агар HiMedia M1540I-1KT HiCrome для листерий Оттавиани-Агости. Рекомендуется для изоляции Listeria monocytogenes; состав и критерии эффективности соответствуют стандартам ISO 11290-1:2017 и ISO 11290-2:2017.

Описание

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды. В основе лежит рецептура Оттавиани и Агости, принятая комитетом ISO, а также рекомендованная APHA и FDA-BAM.

Механизм работы

Питательная основа: пептон HM, триптон и экстракт дрожжей обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты и витамины. Пируват натрия служит дополнительным источником питательных веществ.
Селективность: хлорид лития и селективные добавки (FD212A) подавляют рост сопутствующей микрофлоры.
Дифференциация: виды Listeria гидролизируют хромогенный субстрат (5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид), что приводит к образованию колоний синего или зеленого цвета.
Идентификация L. monocytogenes: дифференциация от других видов Listeria основана на активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC). Фермент гидролизует очищенный субстрат (FD214), создавая вокруг колоний L. monocytogenes характерный опалесцирующий (матовый) ореол.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

Растворить 36,02 г порошка в 465 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
Охладить до 45–50 °C.
В асептических условиях добавить стерильное содержимое 1 флакона добавки для обогащения LP Enrichment Supplement 1 (FD214) и стерильное регидратированное содержимое селективной добавки OA Selective Supplement (FD212A).
Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав базовой среды (г/л)

Компонент	г/л
Пептон HM (эквивалент ферментативного гидролиза тканей животных)	18,000
Триптон (эквивалент ферментативного гидролиза казеина)	6,000
Экстракт дрожжей	10,000
Пируват натрия	2,000
Глюкоза (декстроза)	2,000
Глицерофосфат магния	1,000
Сульфат магния	0,500
Хлорид натрия	5,000
Хлорид лития	10,000
Гидрофосфат натрия двунатриевый	2,500
5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид	0,050
Агар	15,000

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2.

Селективные и обогащающие добавки

OA Selective Supplement (FD212A), мг/флакон:

Компонент	мг/флакон
Налидиксовая кислота (натриевая соль)	10,000
Цефтазидим	10,000
Полимиксин B сульфат	38350 МЕ
Амфотерицин B	5,000

LP Enrichment Supplement 1 (FD214):

Компонент	Количество
L-α-фосфатидилинозитол	1,000 г

Общие параметры

Параметр	Значение
Происхождение компонентов	Животное
Тип продукта	Регулярный
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)
Внешний вид	Гомогенный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета
Желирование	Плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром
Цвет и прозрачность среды	Светло-янтарный, опалесцирующий гель
Диапазон pH	7,00–7,40

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании добавок FD212A и FD214 после инкубации при 37 $\pm$ 1 °C в течение 48 $\pm$ 4 часов.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Цвет колонии	Активность PIPLC
Продуктивность
Listeria monocytogenes ATCC 13932	50–100	обильный	$\ge$ 50%	Сине-зеленый	положительная, матовый ореол вокруг колонии
Listeria monocytogenes ATCC 35152	50–100	обильный	$\ge$ 50%	Сине-зеленый	положительная, матовый ореол вокруг колонии
Специфичность
Listeria innocua ATCC 33090	$10^3$ – $10^4$	обильный	-	Сине-зеленый	отрицательная
Селективность
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	подавлен	-	-	-
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	подавлен	-	-	-
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавлен	-	-	-
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	подавлен	-	-	-

Ограничения и предостережения

Некоторые штаммы L. monocytogenes, подвергшиеся стрессу (особенно кислотному), могут иметь очень слабый ореол или не иметь его вовсе.
Для дифференциации между L. monocytogenes и L. ivanovii требуются дополнительные биохимические тесты, так как оба вида проявляют активность PIPLC (матовый ореол).
Некоторые организмы, не относящиеся к Listeria spp., могут образовывать синие колонии; требуется биохимическая характеристика.
Для окончательного подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Условия эксплуатации и хранения

Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Требования к безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
Утилизация: использованные среды и загрязненные материалы подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.