HiMedia M154-100G Усиленный клостридиальный агар

Порошкообразная питательная среда HiMedia M154-100G Усиленный клостридиальный агар для культивирования и количественного определения Clostridia и других анаэробов, с массовой долей агара 1,35 %. Усиленный клостридиальный агар применяют для анализа пищевых и молочных образцов; готовую среду хранят при 20–30 °C, сухую среду — при 10–30 °C.

Назначение

HiMedia M154-100G предназначен для культивирования и количественного определения Clostridia и других анаэробных микроорганизмов.

Состав

Содержание компонентов приведено в г/л.

• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
• Эквивалент мясного экстракта.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 51,00 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Полужидкая усиленная клостридиальная среда была разработана Hirsch и Grinstead; авторы установили, что на этой среде из небольших количеств образца хорошо выращиваются Clostridia с получением более высоких значений количества жизнеспособных клеток. Среда также может применяться для выращивания анаэробных и факультативных бактерий. Barnes и соавторы использовали твёрдую агаризованную версию среды для развития вегетативных клеток при анализе Clostridium perfringens. Усиленная клостридиальная среда применялась для количественного определения Clostridia в пищевых продуктах.

Усиленный клостридиальный агар содержит следующие функциональные компоненты:

• триптон и пептон HM B — источники углерода, азота, витаминов и минеральных веществ;
• дрожжевой экстракт — источник витаминов группы B, стимулирующих рост бактерий;
• декстроза — источник углеводов;
• хлорид натрия — компонент для поддержания осмотического баланса;
• растворимый крахмал в низких концентрациях — вещество для детоксикации побочных продуктов метаболизма;
• гидрохлорид цистеина — восстановитель;
• ацетат натрия — буферный компонент.

Для придания среде селективных свойств допускается добавление полимиксина B в количестве 15–20 мг на литр среды.

Подготовка образцов и проведение посева

Исследуемый материал гомогенизируют в лабораторном гомогенизаторе типа «стомacher» и готовят разведения. Для количественного определения применяют метод заливных чашек. Инкубируют в анаэробной атмосфере.

При использовании пробирок их сразу после застывания усиленной клостридиальной среды покрывают герметизирующим слоем анаэробного агара.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяют соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы и стандартные меры предосторожности, установленные применимыми методическими документами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для подтверждающих исследований требуется дальнейший пересев культуры.

Рабочие характеристики и оценка среды

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке и при использовании продукта в пределах установленного срока годности, если продукт хранился при рекомендованной температуре.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• Реакция: реакция 5,1%-ного водного раствора при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в анаэробной атмосфере после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

• Обозначения WDCM, соответствующие указанным культурам.

Phocaeicola vulgatus ранее классифицировался как Bacteroides vulgatus.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере, а приготовленную среду — при 20–30 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Наилучшие рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.