HiMedia M151-500G Азотная основа дрожжей без аминокислот и сульфата аммония

Питательная среда HiMedia M151-500G Азотная основа дрожжей без аминокислот и сульфата аммония — химически определённая порошкообразная основа для микробиологических исследований. Применяется для классификации дрожжей по способности ассимилировать соединения азота и углерода; образцы — пищевые продукты, при этом для подтверждения результатов требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Азотная основа дрожжей без аминокислот и сульфата аммония используется для классификации дрожжей по потребности в углеводах и аминокислотах, а также по способности ассимилировать соединения азота и углерода.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M151-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: химически определённая среда HiCynth™
• Тип продукта: стандартный
• Масса: 500 г
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 4,5 ± 0,2
• Температура хранения: 2–8 °C

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH при 25 °C: 4,5 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия заданным рабочим параметрам.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа дрожжевой азотной среды без аминокислот и сульфата аммония предназначена для классификации дрожжей по потребности в углеводах и аминокислотах.

Среда не содержит аминокислоты L-гистидин, DL-метионин и DL-триптофан, а также сульфат аммония. В состав входят основные питательные вещества и витамины, необходимые для культивирования дрожжей, за исключением аминокислот, источника азота и углеводов.

Среда приготовлена в соответствии с формулами Guenter, являющимися модификацией формулы Wickerham. В качестве источников азота по Wickerham применяются:

• сульфат аммония: 1,0 г/л;
• нитрат калия: 0,78 г/л;
• мочевина: 0,46 г/л;
• аспарагин: 1,0 г/л;
• пептон (желатин): 1,32 г/л.

Дрожжи, выращенные на богатой питательной среде, могут сохранять запас азота в форме белков, что способно приводить к ошибочным результатам. Для исключения этого фактора рекомендуется выполнить два последовательных пересева на полной среде.

После достаточной инкубации рост измеряют турбидиметрически при 660 нм с использованием спектрофотометра и сравнивают с контролем.

Методика проведения анализа

Определение ассимиляции углерода

1. Приготовьте основу бульона в концентрации 10×.
2. Растворите 1,7 г основы в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. Добавьте 5 г сульфата аммония, 10 мг L-гистидина, 20 мг DL-метионина и 20 мг DL-триптофана.
4. Добавьте соединения углерода для теста на ассимиляцию по отдельности или в комбинации, в концентрации 10×, в соответствии с поставленной задачей.
5. Раствор концентрации 10× профильтруйте через стерилизующий фильтр.
6. Охладите раствор и храните в холодильнике до использования.
7. Приготовьте конечную среду асептически, перенеся пипеткой 0,5 мл стерильной среды концентрации 10× в 4,5 мл стерильной дистиллированной воды.
8. Тщательно перемешайте.

Определение ассимиляции азота

1. Приготовьте среду в концентрации 10×.
2. Растворите 1,7 г основы в 100 мл дистиллированной воды.
3. Добавьте 1 г декстрозы, 1 мг L-гистидина, 2 мг DL-метионина и 2 мг DL-триптофана.
4. Добавьте соединения азота для теста на ассимиляцию по отдельности или в комбинации, в концентрации 10×, в соответствии с поставленной задачей.
5. В качестве источников азота по Wickerham используют:
   • сульфат аммония: 1 г;
   • нитрат калия: 0,78 г;
   • мочевина: 0,46 г;
   • аспарагин: 1 г;
   • пептон (желатин): 1,32 г.
6. Для вариантов определения ассимиляции углерода и азота раствор концентрации 10× профильтруйте через стерилизующий фильтр.
7. Охладите раствор и храните в холодильнике до использования.
8. Приготовьте конечную среду асептически, перенеся пипеткой 0,5 мл стерильной среды концентрации 10× в 4,5 мл стерильной дистиллированной воды.
9. Тщательно перемешайте.

Образцы и пробоподготовка

• Тип образца: пищевые продукты.
• Отбор и обработку пищевых образцов выполняйте с применением соответствующих методик.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Белый или кремовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Бесцветный прозрачный раствор без осадка. При концентрации 10× среда имеет бледно-жёлтый цвет.

Реакция среды

Реакция 0,17 % водного раствора по массе к объёму при 25 °C:

• pH: 4,5 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 6–7 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

Для подтверждения результатов необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Хранение и срок годности

• Храните сухую обезвоженную и приготовленную среду при температуре 2–8 °C.
• Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом виде.
• Из-за гигроскопичности порошка необходимо предотвращать образование комков.
• Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.