HiMedia M151-500G Азотная основа дрожжей без аминокислот и сульфата аммония

Сухая питательная среда HiMedia M151-500G «Азотная основа дрожжей без аминокислот и сульфата аммония» представляет собой химически определенный компонент (HiCynth™) для классификации дрожжей. Применяется для анализа способности микроорганизмов ассимилировать азот- и углеродсодержащие соединения; конечный pH среды составляет 4,5 ± 0,2 при 25 °C.

Принцип измерения

Среда используется для классификации дрожжей на основе их потребностей в углеводах и аминокислотах. В составе отсутствуют аминокислоты (гистидин, метионин, триптофан), а также сульфат аммония, что позволяет точно определить специфические требования штаммов к источникам азота и углерода. Формулировка основана на методах Гюнтера, которые являются модификацией методики Викерхама.

Для исключения ложных результатов, вызванных резервом азота в форме белков (при выращивании на богатых средах), рекомендуется провести два последовательных пересева в полной среде. Оценка роста проводится турбидиметрически при 660 нм с помощью спектрофотометра в сравнении с контролем.

Методика приготовления и проведения анализа

А. Тесты на ассимиляцию углерода

1. Приготовьте базовый бульон в 10-кратной (10X) концентрации: растворите 1,7 г порошка в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 5 г сульфата аммония, 10 мг L-гистидина, 20 мг DL-метионина и 20 мг DL-триптофана.
3. Углеродные соединения для теста добавляются в 10-кратной концентрации по отдельности или в комбинации.
4. Стерилизуйте раствор 10X методом фильтрации.
5. Приготовьте конечную среду, асептически перенеся 0,5 мл стерильного 10X раствора в 4,5 мл стерильной дистиллированной воды. Тщательно перемешайте.

Б. Тесты на ассимиляцию азота

1. Приготовьте среду в 10-кратной (10X) концентрации: растворите 1,7 г порошка в 100 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 1 г декстрозы, 1 мг L-гистидина, 2 мг DL-метионина и 2 мг DL-триптофана.
3. Добавьте азотсодержащие соединения в 10-кратной концентрации. Типовые источники азота по Викерхаму:
   • сульфат аммония: 1,0 г;
   • нитрат калия: 0,78 г;
   • мочевина: 0,46 г;
   • аспарагин: 1,0 г;
   • пептон (желатин): 1,32 г.
4. Стерилизуйте раствор 10X методом фильтрации.
5. Приготовьте конечную среду, асептически перенеся 0,5 мл стерильного 10X раствора в 4,5 мл стерильной дистиллированной воды. Тщательно перемешайте.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

Внешний вид и реакция

• Вид порошка: белый или кремовый однородный свободнотекущий порошок.
• Цвет и прозрачность среды: бесцветный прозрачный раствор без осадка (при 10-кратной концентрации раствор имеет бледно-желтый цвет).
• Реакция: pH 4,5 ± 0,2 при 25 °C для 0,17% (масса/объем) водного раствора.

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 6–7 суток.

Область применения и работа с образцами

Среда предназначена для анализа проб пищевых продуктов. При сборе и обработке образцов следует руководствоваться соответствующими отраслевыми стандартами.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: от +2 до +8 °C (как для сухой среды, так и для приготовленного раствора).
• Особенности: продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования.
• Требования к помещению: сухое вентилируемое помещение, защищенное от экстремальных температур и источников возгорания.

Меры предосторожности и утилизация

• Безопасность: использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Ограничения: для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.