Основа карбогидратного агара для дрожжей без аминокислот и сульфата аммония HiMedia M151-100G (уп/100 гр)

Питательная среда Основа карбогидратного агара для дрожжей без аминокислот и сульфата аммония HiMedia M151-100G (уп/100 гр) — химически определённая порошкообразная основа без аминокислот и сульфата аммония. Применяется для классификации дрожжей по способности ассимилировать азот- и углеродсодержащие соединения; рост после инкубации оценивают турбидиметрически при 660 нм.

Назначение

Основа карбогидратного агара для дрожжей без аминокислот и сульфата аммония предназначена для классификации дрожжей по способности ассимилировать соединения азота и углерода.

Технические характеристики

• Наименование: HiMedia M151-100G Yeast Nitrogen Base w/o Amino Acids and Ammonium Sulphate
• Назначение изделия: Основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Конечный pH при 25 °C: 4,5 ± 0,2
• Тип образца: пищевые образцы

Состав

Содержание компонентов приведено в граммах на литр.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа используется для классификации дрожжей по потребности в углеводах и аминокислотах. Среда не содержит аминокислоты — гистидин, метионин и триптофан — и сульфат аммония.

Основа приготовлена по формуляциям Guenter, которые, в свою очередь, являются модификацией формуляции Wickerham. Среда содержит необходимые для культивирования дрожжей питательные вещества и витамины, за исключением аминокислот, источника азота и углеводов.

В качестве источников азота Wickerham использовал:

• сульфат аммония: 1,0 г/л;
• нитрат калия: 0,78 г/л;
• мочевина: 0,46 г/л;
• аспарагин: 1,0 г/л;
• пептон (желатин): 1,32 г/л.

Дрожжи, выращенные на богатой питательной среде, могут сохранять запас азота в форме белков, что способно привести к ошибочным результатам. Для предотвращения этого рекомендуется выполнить два последовательных переноса в полную среду.

После достаточной инкубации рост измеряют турбидиметрически при 660 нм с использованием спектрофотометра и сравнивают с контролем.

Методика приготовления среды и проведения тестов

Тесты на ассимиляцию углерода

1. Приготовьте основу бульона в концентрации 10X.
2. Растворите 1,7 г основы в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. Добавьте 5 г сульфата аммония, 10 мг L-гистидина, 20 мг DL-метионина и 20 мг DL-триптофана.
4. Соединения углерода для теста на ассимиляцию добавляйте в концентрации 10X — по одному или в комбинации, в зависимости от требуемой схемы анализа.
5. Отфильтруйте раствор концентрации 10X для стерилизации.
6. Охладите раствор и храните его в холодильнике до использования.
7. Для приготовления конечной среды асептически внесите 0,5 мл стерильной среды концентрации 10X в 4,5 мл стерильной дистиллированной воды.
8. Тщательно перемешайте.

Тесты на ассимиляцию азота

1. Приготовьте среду в концентрации 10X.
2. Растворите 1,7 г основы в 100 мл дистиллированной воды.
3. Добавьте 1 г декстрозы, 1 мг L-гистидина, 2 мг DL-метионина и 2 мг DL-триптофана.
4. Соединения азота для теста на ассимиляцию добавляйте в концентрации 10X — по одному или в комбинации, в зависимости от требуемой схемы анализа.
5. В качестве источников азота могут использоваться следующие соединения по методике Wickerham:
   • сульфат аммония: 1 г;
   • нитрат калия: 0,78 г;
   • мочевина: 0,46 г;
   • аспарагин: 1 г;
   • пептон (желатин): 1,32 г.
6. Отфильтруйте раствор концентрации 10X для стерилизации.
7. Охладите раствор и храните его в холодильнике до использования.
8. Для приготовления конечной среды асептически внесите 0,5 мл стерильной среды концентрации 10X в 4,5 мл стерильной дистиллированной воды.
9. Тщательно перемешайте.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Бесцветный прозрачный раствор без осадка. В концентрации 10X среда имеет бледно-жёлтый цвет.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 0,17 % при 25 °C:

• pH: 4,5 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 6–7 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой и приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого