Хромогенный селективный агар для обнаружения и подсчета уропатогенных бактерий HiMedia M1505-500G (уп./500 гр.)

Хромогенный селективный агар для обнаружения и подсчета уропатогенных бактерий HiMedia M1505-500G (уп./500 гр.) — диагностическая агаровая питательная среда с хромогенными субстратами и селективным действием желчных солей. HiMedia M1505-500G применяется для идентификации, дифференциации и подтверждения энтеробактерий в образцах мочи, фекалий и воды, при этом интенсивность окраски колоний может зависеть от конкретного изолята.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для идентификации, дифференциации и подтверждения кишечных бактерий в образцах, включая мочу с возможным высоким содержанием видов Proteus, а также потенциально патогенных грамположительных микроорганизмов.

Типы образцов:

• Клинические образцы: моча, фекалии и другие.
• Образцы воды.

Среда предназначена для применения в лабораторной диагностике in vitro и только квалифицированным профессиональным персоналом.

Состав

Формула рассчитана на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

HiCrome® UTI Selective Agar разработан на основе исследований Pezzlo, Wilkie и соавторов, Friedman и соавторов, Murray и соавторов, Soriano и Ponte, Merlino и соавторов. Среда является модификацией HiCrome® UTI Agar M1353 и может применяться вместо агара МакКонки для выделения и подтверждения различных микроорганизмов.

Идентификация отдельных грамотрицательных и грамположительных бактерий ускоряется за счёт контрастной окраски колоний. Окраска формируется в результате расщепления двух хромогенных субстратов ферментами, специфичными для определённых родов или видов.

Ферменты, продуцируемые видами Enterococcus, Escherichia coli и колиформными бактериями, расщепляют хромогенные субстраты, включённые в состав среды.

Пептон и триптон обеспечивают среду богатыми источниками фенилаланина и триптофана. Это позволяет выявлять активность триптофан-дезаминазы с помощью реагента TDA (R036), что указывает на присутствие видов Proteus, Morganella и Providencia, образующих коричневые колонии.

Один из хромогенных субстратов расщепляется β-глюкозидазой, которой обладают энтерококки, с образованием синих колоний.

Escherichia coli образует пурпурно-малиновые колонии благодаря ферменту β-D-галактозидазе, расщепляющему другой хромогенный субстрат. Дополнительное подтверждение E. coli выполняют с помощью индольного теста с реагентом DMACA (R035).

Некоторые штаммы Enterobacter cloacae, не продуцирующие β-глюкозидазу, образуют розовые колонии, неотличимые от колоний E. coli. Индольный тест с реагентом DMACA проводят на фильтровальной бумаге; тест позволяет различать E. coli и Enterobacter, а также Proteus mirabilis и другие виды.

Колиформные бактерии образуют пурпурные колонии вследствие расщепления обоих хромогенных субстратов.

Пептон, пептон HM B и триптон обеспечивают среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, а также другими необходимыми для роста питательными веществами.

Селективность HiCrome® UTI Selective Agar обеспечивается добавлением желчных солей, избирательно подавляющих рост грамположительных бактерий.

По сравнению с HiCrome® UTI Agar M1353 среда HiCrome® UTI Selective Agar представляет собой модифицированную формулу, предназначенную для выделения и подтверждения микроорганизмов с использованием контрастной окраски колоний.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 56,94 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на кв. дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа или 1,03 бар.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к сбору и обращению с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным методическим руководствам.

Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методическим руководствам и локальным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Реакция основана на взаимодействии фермента с субстратом, поэтому интенсивность окраски может различаться у разных изолятов.
• Отдельные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую картину роста на среде.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородный свободносыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,69 % м/об при 25 °C; pH 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Звёзд