Питательная среда PYR агар для выделения и идентификации S.pyogenes HiMedia M1489-500G (уп/500 гр) — агаровая среда в упаковке 500 г для выявления Streptococcus pyogenes по гидролизу PYR. Применяется для выделения и предварительной идентификации микроорганизмов из клинических и неклинических образцов; готовую среду инкубируют при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Назначение и область применения

Среда предназначена для выделения и идентификации Streptococcus pyogenes из клинических и неклинических образцов.

Тип образца: выделенный микроорганизм из клинического или неклинического образца.

Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Эквивалентно настою из сердца крупного рогатого скота.

Конечный pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2.

Принцип измерения и интерпретация

Гидролиз PYR используют как presumptive-тест для стрептококков группы A и группы D, включая энтерококки. PYR-тест определяет активность фермента L-пирролидонилариламидазы (PYR), который продуцируется Streptococcus pyogenes, но не продуцируется другими β-гемолитическими стрептококками.

В результате гидролиза образуется свободный β-нафтиламид, который выявляют добавлением диазокрасительного комплекса N,N-диметиламиноциннамальдегида. Появление красного окрашивания указывает на положительный результат гидролиза PYR.

PYR-тест применяют для выявления и предварительной идентификации S. pyogenes на основании гидролиза PYR. Метод отличается высокой чувствительностью и используется вместо тестов с бацитрацином и определения устойчивости к соли, основанного на росте в среде с 6,5 % NaCl.

Основой питательной среды служит бульонная основа Todd Hewitt (M313), к которой добавлены агар и субстрат для фермента PYR. Настой HM B и пептон обеспечивают микроорганизмы азотистыми питательными веществами. Декстроза является углеводом и источником энергии. Динатрий фосфат выполняет функцию буферного компонента, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Хромогенная смесь содержит субстрат для фермента PYR.

После инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч на подозрительный поверхностный рост на чашке вносят 1 каплю реагента PYR (R043). Изменение окраски оценивают через 2 мин. Хромогенная смесь гидролизуется S. pyogenes с образованием L-пирролидона и β-нафтиламина. Реагент PYR реагирует с β-нафтиламином с образованием красного основания Шиффа, что указывает на положительную реакцию.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 52,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид: однородный свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета, формирующийся в чашках Петри.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,2 % масс./об. при 25 °C; pH 7,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. Ложноотрицательный результат возможен, если диск или фильтровальная бумага имеют избыточную влажность.
2. Ложноотрицательный результат возможен при использовании для получения инокулята селективных сред или биохимических агаров в пробирках.
3. Escherichia coli и индолположительные представители рода Proteus, полученные на средах с высоким содержанием триптофана, могут давать сине-зелёное окрашивание. Такая реакция является отрицательной.
4. Некоторые редко встречающиеся изоляты лактококков и аэрококков могут быть PYR-положительными.
5. При считывании результата позднее чем через 20 с могут возникать неспецифические цветовые реакции.

Условия хранения и срок годности

Температура хранения сухой среды: 15–25 °C.

Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.

Храните продукт в плотно закрытом контейнере в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии для предотвращения комкования из-за гигроскопичности продукта.

Ненадлежащее хранение может привести к образованию комков. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Утилизируйте инфекционные материалы в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать с соблюдением действующих лабораторных методов.