Основа агара с полимиксином, яичным желтком, маннитом и БТБ HiMedia M1484-500G (уп/500 гр)

Основа агара с полимиксином, яичным желтком, маннитом и БТБ HiMedia M1484-500G (уп/500 гр) предназначена для культивирования Bacillus cereus. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 21871:2006.

Принцип измерения и интерпретация

Среда PEMBA (Polymyxin Pyruvate Egg Yolk Mannitol Bromothymol Blue Agar), разработанная по методике Холбрука и Андерсона, является высокоспецифичной селективной средой для выделения и количественного определения B. cereus в пищевых продуктах.

Селективность обеспечивается добавлением полимиксина и строго контролируемой концентрацией питательных веществ. Низкое содержание пептона стимулирует споруляцию, а пируват натрия уменьшает размер колоний организмов.

Индикация основана на двух реакциях:

1. Лецитиназная активность: эмульсия яичного желтка проявляется в виде зоны помутнения (опалесценции) вокруг колоний.
2. Ферментация маннита: бромтимоловый синий (БТБ) служит pH-индикатором для обнаружения расщепления маннита.

B. cereus образует синие колонии с зазубренными краями, окружённые зоной помутнения. Следует учитывать, что на данной среде B. cereus не отличим от B. thuringiensis, а некоторые штаммы могут давать слабую реакцию с яичным желтком.

Область применения

Среда используется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. Применяется в микробиологических лабораториях для контроля безопасности продуктов питания, так как B. cereus вызывает пищевые отравления при употреблении загрязнённых овощей, проростков, мяса, заварных кремов, супов, варёного или жареного риса, а также может быть причиной маститов у овец и телёк.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 4,39 г порошка в 90 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона добавки PEMBA Supplement (FD200) и 5 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Сбор и обработка образцов

При работе с пищевыми и молочными пробами следуйте соответствующим руководствам по сбору и обработке. После использования загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г / 100 мл)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2

Общие параметры

• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,8% агаром.
• Цвет и прозрачность: базальная среда — зелёный прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления эмульсии яичного желтка — темно-зелёный непрозрачный гель.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании добавки PEMBA (FD200) и эмульсии яичного желтка (FD045) после инкубации при 37 ± 1 °C.

Ограничения метода

• Различные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis проявляют идентичные характеристики, что затрудняет их дифференциацию.
• Идентификация B. cereus проводится по характеристикам колоний и реакциям, однако для окончательного подтверждения необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• Некоторые штаммы B. cereus обладают очень слабой реакцией с яичным желтком.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищённом от перепадов температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными процедурами для инфекционных материалов.