Агар для быстрого выделения E.coli и колиформных бактерий хромогенным и флюорогенным методом HiMedia M1465-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Агар для быстрого выделения E.coli и колиформных бактерий хромогенным и флюорогенным методом HiMedia M1465-500G (уп/500 гр) — порошковый агар для одновременного выявления Escherichia coli и общих колиформных бактерий. Среда предназначена для анализа проб воды и пищевых продуктов по ферментативной реакции с использованием хромогенного и флюорогенного субстратов, а подтверждение E. coli выполняют реакцией с реактивом Ковача.

Назначение и область применения

Среда HiMedia M1465-500G предназначена для быстрого выявления и подтверждения наличия Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основании фермент-субстратной реакции. Также применяется для анализа пищевых образцов.

• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: агар
• Тип продукта: стандартный
• Форма продукта: порошок
• Происхождение: животное
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав, г/л:

Скорректированная и стандартизированная формула предназначена для обеспечения заданных рабочих параметров.

• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Упаковка: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Принцип действия и интерпретация результатов

Rapid HiColiform Agar представляет собой модификацию жидкой среды LMX, описанной Manafi и Kneifel. Среда используется для одновременного выявления общих колиформных бактерий и Escherichia coli с применением хромогенного и флюорогенного субстратов.

• Специальный пептон с высоким содержанием триптофана обеспечивает необходимые питательные вещества и позволяет одновременно выявлять образование индола.
• Сорбитол служит источником углерода.
• Фосфатные соли выполняют буферную функцию, обеспечивая быстрый рост колиформных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт подавления сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.
• Флюорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, который специфичен для Escherichia coli. Положительная реакция проявляется голубой флуоресценцией колоний при ультрафиолетовом освещении.
• Наличие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию колоний вследствие расщепления хромогенного субстрата.
• IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.
• Для подтверждения наличия E. coli на подозрительную колонию наносят 2–3 капли реактива Ковача. При положительной реакции колония окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Сочетание хромогенного и флюорогенного субстратов позволяет одновременно оценивать признаки общих колиформных бактерий и Escherichia coli в одной питательной среде.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 31,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.

Типы образцов и обращение с пробами

• Тип образца: пищевые продукты
• Тип образца: вода

Для пищевых образцов применяют соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим рекомендациям. Для проб воды используют соответствующие методы отбора и обработки с учётом действующих методик и местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Около 97 % штаммов E. coli являются β-D-глюкуронидазоположительными, однако отдельные штаммы могут не давать положительной флуоресценции.
2. Для подтверждения результата необходимо дополнительно провести биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Реакция: реакция 3,1 % водного раствора, измеренная при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: