Диагностическая питательная среда Агар для быстрого выделения E.coli и колиформных бактерий хромогенным и флюорогенным методом HiMedia M1465-100G (уп/100 гр) с содержанием агара 15,000 г/л. Среда предназначена для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктах с использованием фермент-субстратной реакции, при этом отдельные штаммы E. coli могут не давать флуоресценции.

Назначение

HiMedia M1465-100G — агаровая питательная среда для одновременного обнаружения общих колиформных бактерий и Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктов.

Тип питательной среды: диагностический.
Назначение изделия: агар.
Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
Тип продукта: стандартный.
Физическая форма: порошок.
Происхождение: животное.
Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).

Принцип выявления и интерпретация результатов

Среда представляет собой модификацию бульона LMX, описанную Manafi и Kneifel, и предназначена для одновременного выявления общих колиформных бактерий и Escherichia coli на основании реакций с хромогенным и флюорогенным субстратами.

Специальный пептон с высоким содержанием триптофана обеспечивает необходимые питательные вещества для роста и позволяет одновременно выявлять образование индола. Сорбитол служит источником углерода. Фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий. Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт ингибирования сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.

Флуорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, которая характерна для Escherichia coli. Положительная реакция проявляется синей флуоресценцией колоний при ультрафиолетовом освещении. Наличие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию колоний вследствие расщепления хромогенного субстрата.

IPTG (1-изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид) усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.

Для подтверждения присутствия E. coli необходимо нанести 2–3 капли реактива Ковача на подозрительную колонию. При положительной реакции колония окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Конечное значение pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Приготовление питательной среды

1. Суспендируйте 31,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление при стерилизации — 15 фунтов, приблизительно 0,10 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые продукты.
• Пробы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов в соответствии с установленными руководствами.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов с учётом установленных руководств и местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. β-D-глюкуронидаза выявляется у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы могут давать отрицательную флуоресценцию.
2. Для подтверждения необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, легко сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция: реакция 3,1%-ного водного раствора при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Хранение сухой среды: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
• Использование: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Отработанные инфекционные материалы и материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками и установленными процедурами обращения с инфекционными материалами.