Агар для быстрого выделения E.coli и колиформных бактерий хромогенным и флюорогенным методом HiMedia M1465-100G (уп/100 гр)

Диагностический агар для быстрого выделения E. coli и колиформных бактерий HiMedia M1465-100G хромогенным и флюорогенным методом. Применяется для обнаружения и подтверждения наличия Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды и пищевых продуктах на основе ферментативных реакций.

Принцип измерения

Среда Rapid HiColiform™ представляет собой модификацию бульона LMX. Она предназначена для одновременного выявления общих колиформ и Escherichia coli с использованием комбинации хромогенных и флюорогенных субстратов.

Основные компоненты и их функции:

• Специальный пептон: богат триптофаном, обеспечивает необходимые питательные вещества и позволяет одновременно определять продукцию индола.
• Сорбитол: служит источником углерода.
• Фосфатные соли: поддерживают буферную емкость для быстрого роста колиформ.
• Лаурилсульфат натрия: обеспечивает селективность среды, подавляя рост сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных организмов.
• Флюорогенный субстрат: расщепляется ферментом $\beta$-D-глюкуронидазой, который специфичен для Escherichia coli. Реакция проявляется синей флуоресценцией под УФ-светом.
• Хромогенный субстрат: расщепление этого субстрата приводит к появлению сине-зелёного цвета колоний, что указывает на присутствие общих колиформ.
• IPTG (1-изопропил-$\beta$-D-1-тиогалактопиранозид): усиливает синтез ферментов и повышает активность $\beta$-D-галактозидазы.

Для подтверждения наличия E. coli на подозрительную колонию добавляют 2–3 капли реактива Ковакса: при положительной реакции колония окрашивается в красный цвет в течение 2 минут.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 31,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Область применения и работа с образцами

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Пробы воды.
• Пищевые продукты.

При сборе и обработке проб следует руководствоваться соответствующими методическими указаниями и местными стандартами. После использования загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения метода

• Около 97 % штаммов E. coli являются $\beta$-D-глюкуронидаза-положительными; отдельные штаммы могут проявлять отрицательную флуоресценцию.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• pH (водного раствора 3,1 % при 25 °C): 6,60–7,00 (номинал 6,8 $\pm$ 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами следует использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица, соблюдая правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. Утилизация использованных препаратов должна осуществляться путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.