HiMedia M1454-100G Основа агара для скрининга устойчивости к оксациллину

Микробиологическая питательная среда — основа агара для скрининга устойчивости к оксациллину HiMedia M1454-100G, сухой порошок для приготовления селективной среды с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выявления микроорганизмов, устойчивых к оксациллину, в клинических образцах; любой рост, включая одну колонию, интерпретируется как устойчивость к метициллину (оксациллину), но результаты требуют подтверждения методом разведения в агаре или бульоне.

Назначение

Основа агара HiMedia M1454-100G предназначена для скрининга микроорганизмов, устойчивых к оксациллину, выделенных из клинических образцов.

Тип образца: выделенные микроорганизмы из клинических образцов.

Состав

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 51,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; давление 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки XA Selective Supplement (FD191).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Агар для скрининга устойчивости к оксациллину, первоначально называвшийся агаром для скрининга MRSA, разработан для выявления метициллин-резистентного Staphylococcus aureus (MRSA). Такие штаммы устойчивы к пенициллинам, устойчивым к пенициллиназе, включая метициллин, оксациллин и нафциллин.

Метод выявления MRSA использует ту же посевную суспензию, что и процедура определения чувствительности к антимикробным дискам по Бауэру—Кирби. Поэтому тест на устойчивость к оксациллину может выполняться одновременно с рутинным исследованием чувствительности выделенных культур.

Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является известным условно-патогенным микроорганизмом человека. Как внутрибольничный патоген Staphylococcus aureus служит значимой причиной заболеваемости и смертности. Устойчивость S. aureus к пенициллину наблюдалась вскоре после внедрения пенициллина в конце 1940-х годов. К концу 1960-х годов начали появляться метициллин- и оксациллин-резистентные штаммы S. aureus, выделенные в США. В 1980-х годах устойчивый к оксациллину, ранее называвшийся устойчивым к метициллину, S. aureus стал существенной клинической и эпидемиологической проблемой в больницах.

Функции компонентов среды:

• Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые питательные вещества.
• Маннитол является ферментируемым углеводом для дифференциации микроорганизмов.
• Большое содержание хлорида натрия — 5,5 % — придаёт среде селективные свойства.
• Хлорид лития подавляет рост многих загрязняющих микроорганизмов, за исключением Staphylococcus aureus.
• Анилиновый синий является инертным индикатором липолиза при добавлении в среду субстратов липазы.
• Большинство коагулазонегативных видов стафилококков и микрококков не ферментируют маннитол.

Иногда изоляты S. aureus с пограничными минимальными подавляющими концентрациями могут не дать роста в течение 24 ч. Любые сомнительные результаты на скрининговой чашке рекомендуется подтверждать стандартным тестом на минимальную подавляющую концентрацию.

Вероятность появления резистентной субпопуляции выше в большой популяции бактериальных клеток. Устойчивость бактериальных изолятов, растущих на агаре для скрининга устойчивости к оксациллину, необходимо дополнительно подтверждать методом разведения в агаре или бульоне. Также следует определить устойчивость изолятов к другим антимикробным препаратам, характерную для MRSA.

Использование агара для скрининга устойчивости к оксациллину для выявления метициллин- или оксациллин-резистентных коагулазонегативных стафилококков не рекомендуется.

Интерпретация роста:

• Любой рост, включая одну колонию, указывает на устойчивость изолята к метициллину (оксациллину).
• Отсутствие роста указывает на чувствительность микроорганизма к метициллину и оксациллину.
• Изоляты, растущие на агаре для скрининга устойчивости к оксациллину, следует регистрировать как устойчивые ко всем β-лактамным антимикробным препаратам, включая комбинации β-лактамов с ингибиторами β-лактамаз и цефалоспорины.

Технические характеристики

• Наименование: основа агара для скрининга устойчивости к оксациллину
• Артикул: M1454-100G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение компонентов: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 10,35 %
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,25%-ным агаровым гелем
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: синий прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Контроль качества

Внешний вид порошка

Однородный сыпучий порошок от жёлтого до серовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,25%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется синий прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 10,35%-ного водного раствора при 25 °C соответствует pH 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки XA Selective Supplement (FD191) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Тип образца и обращение с ним

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения метода

1. Устойчивость бактериальных изолятов, растущих на агаре для скрининга устойчивости к оксациллину, необходимо дополнительно подтверждать методом разведения в агаре или бульоне.
2. Следует определить устойчивость изолятов к другим антимикробным препаратам, характерную для MRSA.
3. Изоляты S. aureus с пограничными минимальными подавляющими концентрациями могут не дать роста в течение 24 ч; сомнительные результаты необходимо подтверждать стандартным тестом на минимальную подавляющую концентрацию.
4. Метод не рекомендуется для выявления метициллин- или оксациллин-резистентных коагулазонегативных стафилококков.

Меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие практики микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Приготовленная среда: хранение при 2–8 °C.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются наилучшим образом при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие