Основа колумбийского бульона HiMedia M145-500G (уп/100 гр)

Основа питательной среды Основа колумбийского бульона HiMedia M145-500G (уп/100 гр), производства HiMedia, предназначена для приготовления жидкой среды с конечным pH 7,5 ± 0,2. Основа колумбийского бульона применяется как среда общего назначения и для культивирования прихотливых микроорганизмов из клинического материала; рабочая концентрация при приготовлении составляет 35,01 г/л.

Назначение

Основа колумбийского бульона HiMedia M145-500G используется для:

• культивирования микроорганизмов общего назначения;
• выделения и культивирования прихотливых микроорганизмов из клинических образцов;
• получения жидкой среды для посева образцов крови и других клинических материалов;
• культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов.

Тип питательной среды: базовый.

Назначение изделия: основа.

ФСЗ: 2009/03707.

Состав

Для приготовления среды используют 35,01 г сухой основы на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей работы среды.

Эквивалент: порошок для сердечно-мозговой инфузионной среды.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 35,01 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. При необходимости добавьте SPS — полинафталинсульфонат натрия — до конечной концентрации 0,01 %.
4. Разлейте приготовленную среду по пробиркам.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
6. Охладите среду до 45–50 °C.

Принцип действия и интерпретация

Жидкая среда была разработана Morello и Ellner в 1969 году для восстановления микроорганизмов при исследовании посевов крови. Рецептура создана на основе колумбийского кровяного агара, ранее разработанного Ellner и соавторами.

Колумбийский бульон обеспечивает более быстрый рост Staphylococcus aureus, Escherichia coli, зеленящих стрептококков и представителей группы Enterococcus по сравнению с обычно применяемым бульоном общего назначения. Повышенная концентрация цистина способствует восстановлению аэробных и анаэробных микроорганизмов из образцов крови.

При добавлении SPS, полиа-нионного антикоагулянта, компонент:

• ингибирует активность комплемента и лизоцима;
• препятствует фагоцитозу;
• инактивирует аминогликозиды.

Присутствие CO₂ стимулирует рост многих микроорганизмов. Колумбийский бульон применяется как среда для посевов крови.

По сравнению с агаровой основой в составе отсутствует кукурузный крахмал, что снижает опалесценцию среды; одновременно в рецептуру включены соли.

Функции компонентов:

• специальный пептон, биопептон и порошок HI обеспечивают обильный рост микроорганизмов;
• декстроза служит источником углерода и энергии;
• трис-буфер поддерживает буферную ёмкость среды;
• добавление солей способствует восстановлению микроорганизмов;
• L-цистеина гидрохлорид выполняет функцию восстановителя;
• магний и железо способствуют росту микроорганизмов.

Посев и оценка роста

Жидкие среды в пробирках инокулируют 1–2 каплями жидкого образца с использованием стерильной пипетки. Тампоны с образцами можно помещать в бульон после инокуляции чашек с плотной питательной средой.

Для анаэробной инкубации жидкую среду необходимо предварительно восстановить: пробирки с ослабленными крышками помещают в анаэробные условия на 18–24 ч до инокуляции. Альтернативный способ — непосредственно перед использованием прокипятить среду с ослабленными крышками, затем охладить до комнатной температуры и плотно закрыть крышки перед инокуляцией.

О росте в пробирке свидетельствует появление мутности по сравнению с неинокулированным контролем. При обнаружении роста культуры следует пересевать на подходящие питательные среды.

Добавление SPS ингибирует виды Neisseria. Для уменьшения ингибирующего эффекта допускается добавление желатина в концентрации 1,2 %.

Типы образцов

Клинические образцы:

• фекалии;
• моча;
• гной.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами необходимо применять соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид сухого продукта: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий; может присутствовать мелкодисперсный осадок.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,5 % масс./об. при 25 °C.

pH водного раствора: 7,30–7,70.

Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на этой среде.
2. Каждая серия среды испытана на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При использовании среды для конкретного микроорганизма, отсутствующего в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать пригодность среды с учётом собственной задачи.
3. Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на эти