Цитратный агар Кристенсена HiMedia M143-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Цитратный агар Кристенсена HiMedia M143-500G (уп/500 гр) — агаровая среда для дифференциации энтеробактерий по способности утилизировать цитрат натрия. Применяется для выявления кишечных патогенов и колиформ в клинических, пищевых, молочных и водных образцах; чрезмерно высокая посевная доза может привести к ложноположительной реакции.

Назначение

Цитратный агар Кристенсена предназначен для дифференциации энтеробактерий по способности использовать цитрат в качестве единственного источника углерода и энергии. Среда применяется для анализа:

• клинических образцов, включая фекалии;
• пищевых и молочных образцов;
• образцов воды.

Тип питательной среды: дифференциальная.
Назначение изделия: агар.
Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, микробное происхождение.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров работы среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 24,8 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, ориентировочно 0,10 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скошенной поверхности.

Принцип измерения и интерпретация

Цитратный агар Кристенсена представляет собой модификацию железного агара Кристенсена. Рецептура железного агара Кристенсена аналогична, за исключением дополнительного тиосульфата натрия и цитрата аммония-железа, описанных Эдвардсом и Юингом.

По данным Кристенсена, все представители родов Escherichia, Enterobacter, Citrobacter и Salmonella способны использовать цитрат как источник энергии, тогда как виды Shigella не используют цитрат. Эдвардс и Юинг рекомендовали трёхсахарный железный агар (TSI, M021) для определения образования сероводорода и цитратный агар Кристенсена — для определения утилизации цитрата.

Микроорганизмы, метаболизирующие цитрат как единственный источник углерода, расщепляют цитрат до оксалоацетата и ацетата с участием фермента цитритазы. Затем фермент оксалоацетатдекарбоксилаза преобразует оксалоацетат в пируват и CO₂. Образующийся CO₂ взаимодействует с натрием и водой с образованием карбоната натрия — щелочного соединения. В результате pH среды повышается, а индикатор феноловый красный изменяет цвет с оранжево-красного на вишнёво-красный. Вишнёвая окраска указывает на положительную реакцию утилизации цитрата.

Функции компонентов среды:

• дрожжевой экстракт обеспечивает питательные вещества, главным образом азотистые соединения и витамины, необходимые для роста микроорганизмов;
• L-цистеина гидрохлорид действует как восстановитель;
• декстроза является сбраживаемым углеводом;
• цитрат натрия служит источником энергии для микроорганизмов, утилизирующих цитрат;
• феноловый красный используется как индикатор изменения pH;
• агар формирует гелевую основу среды.

При инокуляции необходимо соблюдать осторожность: слишком высокая посевная доза может привести к ложноположительному результату.

Требования к образцам и обращению

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Масса упаковки: 500 г.
Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.
Рабочий диапазон pH: 6,70–7,10.
Концентрация водного раствора для оценки реакции: 2,48 % масса/объём.
Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-розовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется оранжево-красный, очень слабо опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция 2,48%-ного водного раствора масса/объём при 25 °C: pH 6,9 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее Klebsiella aerogenes обозначалась как Enterobacter aerogenes.

Ограничения применения

• Перед использованием воды убедитесь, что её pH находится в диапазоне 6,70–7,10. При несоблюдении этого требования исходный цвет среды может отличаться от ожидаемого.
• pH влияет на рабочие характеристики среды и должен контролироваться с соблюдением установленного диапазона.
• Слишком высокая посевная доза может вызывать ложноположительную реакцию на утилизацию цитрата.
• Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованных условиях.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии.
• Среда гигроскопична; при ненадлежащем хранении возможно образование комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры безопасности

Среда предназначена для