Питательная дифференциально-диагностическая среда HiMedia M143-100G «Цитратный агар Кристенсена» — порошковый агар для определения утилизации цитрата. Среда предназначена для дифференциации кишечных патогенов и колиформ из клинических и не клинических образцов; готовую среду хранят при 2–8 °C.

Назначение

Цитратный агар Кристенсена применяют для дифференциации энтеропатогенов и колиформных бактерий из клинических и не клинических образцов по способности утилизировать цитрат.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Цитратный агар Кристенсена представляет собой модификацию железного агара Кристенсена. Формула железного агара Кристенсена отличается наличием тиосульфата натрия и цитрата аммония и железа.

Согласно данным Кристенсена, все представители родов Escherichia, Enterobacter, Citrobacter и Salmonella способны использовать цитрат как источник энергии, тогда как виды рода Shigella не утилизируют цитрат. Для определения образования сероводорода рекомендуется использовать трёхсахарный железный агар (M021), а цитратный агар Кристенсена — для определения утилизации цитрата.

Организмы, метаболизирующие цитрат как единственный источник углерода, расщепляют цитрат до оксалоацетата и ацетата под действием фермента цитритазы. Затем фермент оксалоацетатдекарбоксилаза преобразует оксалоацетат в пируват и CO₂. Образующийся CO₂ взаимодействует с натрием и водой с образованием карбоната натрия — щелочного соединения. В результате pH среды повышается, а индикатор феноловый красный изменяет цвет с оранжево-красного на вишнёвый. Вишнёвая окраска свидетельствует о положительной реакции на утилизацию цитрата.

• Дрожжевой экстракт обеспечивает необходимые для роста организмов питательные вещества, главным образом азотистые соединения и витамины.
• L-цистеин гидрохлорид выполняет функцию восстановителя.
• Декстроза является сбраживаемым углеводом.
• Цитрат натрия служит источником энергии для организмов, утилизирующих цитрат.
• При посеве следует избегать чрезмерно большой посевной дозы: слишком плотный посев может привести к ложноположительному результату.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 24,8 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C и давлении около 0,10 МПа (15 фунтов на кв. дюйм) в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в наклонном положении, чтобы подготовленная среда застыла в виде скошенного агара.

Пробоподготовка и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной работы.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Перед использованием воды убедитесь, что её pH составляет 6,70–7,10. При несоблюдении этого требования исходный цвет среды может отличаться от ожидаемого.
2. pH влияет на рабочие характеристики среды и должен контролироваться.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность подготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется оранжево-красный, очень слабо опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция 2,48%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,9 ± 0,2.

pH

6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Enterobacter aerogenes — прежнее наименование Klebsiella aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения подготовленной среды: 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом, проветриваемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Технические характеристики