EC 0157 агар модифицированный с МУГ HiMedia M1429-500G (уп/500 гр)

Агаровая питательная среда EC 0157 агар модифицированный с МУГ HiMedia M1429-500G (уп/500 гр) предназначена для прямого выделения и дифференциации Escherichia coli O157:H7 и содержит МУГ — 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид. Среда применяется для анализа пищевых продуктов, молочных продуктов, воды и клинических образцов; предназначена для профессиональной диагностики вне организма и требует подтверждения выделенных микроорганизмов биохимическими и серологическими тестами.

Назначение

Среда рекомендована для прямого выделения и дифференциации Escherichia coli O157:H7 из пищевых продуктов и других образцов. Также используется для выделения и количественного определения энтерогеморрагических Escherichia coli (EHEC) из пищевых продуктов, воды и клинических образцов на основании утилизации сорбита и образования β-глюкуронидазы.

Соответствие: ФСЗ 2009/03705; ГОСТ Р 54354-2011.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Принцип действия и интерпретация

Серотип Escherichia coli O157:H7 выделяют с учётом его неспособности утилизировать сорбит.

Энтерогеморрагические E. coli (EHEC) вырабатывают токсины, которые могут вызывать у человека кровянистую диарею, вероятно вследствие токсического повреждения эндотелиальных клеток сосудов. При геморрагическом колите обычно наблюдаются абдоминальные спазмы и водянистая диарея с последующими геморрагическими выделениями, напоминающими кровотечение из нижних отделов желудочно-кишечного тракта. Штаммы энтерогеморрагических E. coli O157:H7 вырабатывают токсины, способные приводить к опасным для жизни внекишечным осложнениям, включая гемолитико-уремический синдром и тромботическую тромбоцитопеническую пурпуру. Поэтому выделение и обнаружение штамма E. coli O157:H7 имеет санитарно-эпидемиологическое значение.

• Желчные соли подавляют рост грамположительных микроорганизмов.
• Сорбит служит источником углерода и энергии.
• Бромкрезоловый пурпурный является индикатором pH.
• Микроорганизмы, утилизирующие сорбит, образуют жёлтые колонии.
• Сорбитол-отрицательные штаммы, включая E. coli O157:H7, образуют бесцветные колонии.
• МУГ расщепляется β-глюкуронидазой; продукты реакции выявляются по флуоресценции в ультрафиолетовом свете.
• Для усиления флуоресценции чашки выдерживают в парах аммиака.
• Все комменсальные E. coli продуцируют β-глюкуронидазу, расщепляют МУГ и флуоресцируют при наблюдении в длинноволновом ультрафиолетовом свете с длиной волны 366 нм.
• E. coli O157:H7 не способна образовывать β-глюкуронидазу, поэтому при воздействии длинноволнового ультрафиолетового света флуоресценция отсутствует.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 58,18 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы

• Клинические образцы.
• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно методическим рекомендациям.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки согласно методическим рекомендациям и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-фиолетового цвета в чашках Петри.
• Реакция: реакция 5,8%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH по реакции раствора: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 16–24 ч.