EC 0157 агар модифицированный с МУГ HiMedia M1429-500G (уп/500 гр)

Модифицированный агар EC 0157 с МУГ HiMedia M1429-500G (уп/500 г) предназначен для прямой изоляции и дифференциации Escherichia coli O157:H7. Среда используется для анализа пищевых продуктов, проб воды и клинического материала; соответствует ГОСТ Р 54354-2011.

Принцип измерения

Изоляция серотипа E. coli O157:H7 основана на его способности не утилизировать сорбитол (сорбитолоотрицательность) и отсутствии активности фермента $\beta$-глюкуронидазы.

• Селективность: Соли желчных кислот подавляют рост грамположительных микроорганизмов.
• Дифференциация по сорбитолу: Сорбитол служит источником углерода и энергии. Микроорганизмы, утилизирующие сорбитол, образуют жёлтые колонии, в то время как сорбитолоотрицательные штаммы (включая E. coli O157:H7) растут в виде бесцветных колоний. Бромкрезоловый пурпурный служит индикатором pH.
• Детекция $\beta$-глюкуронидазы: 4-метилумбеллиферил-$\beta$-D-глюкуронид (МУГ) расщепляется ферментом $\beta$-глюкуронидазой с образованием флуоресцирующего продукта. Большинство комменсальных штаммов E. coli вырабатывают этот фермент и флуоресцируют под длинноволновым УФ-светом (366 нм). Штаммы E. coli O157:H7 не способны синтезировать $\beta$-глюкуронидазу, поэтому при облучении УФ-светом флуоресценция отсутствует.

Для усиления флуоресценции чашки могут подвергаться воздействию паров аммиака или обработке раствором NaOH.

Методика приготовления и использования

1. Приготовление: Растворить 58,18 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Растворение: Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизация: Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Разлив: Охладить среду до 45–50 °C, тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Область применения

Среда рекомендована для выделения и количественного определения энтерогеморрагических E. coli (EHEC) из следующих типов образцов:

• Клинические образцы.
• Пищевые продукты и молочная продукция.
• Пробы воды.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: Гомогенный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: Плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: Светло-пурпурный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,00–7,40 (для 5,8 % водного раствора при 25 °C: 7,2 $\pm$ 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 16–24 часов.

Примечание: Флуоресценция визуализируется при добавлении раствора NaOH или воздействии паров аммиака.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: В плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищённом от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: При температуре 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: Для окончательной идентификации штаммов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Меры безопасности: Только для профессионального использования (In Vitro диагностика). При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: Загрязнённые материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации перед утилизацией.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Назначение: Агар.