Основа модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса (MSRV) HiMedia M1428I-500G (уп/500 гр)

Сухая основа питательной среды «Основа модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса (MSRV) HiMedia M1428I-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia содержит 2,700 г/л агара и предназначена для приготовления полутвёрдой селективной среды. Основа применяется для селективного обогащения и выделения подвижных видов Salmonella из пищевых продуктов и образцов окружающей среды; для неподвижных штаммов Salmonella не предназначена.

Назначение и область применения

Основа модифицированной полутвёрдой среды Раппапорта—Вассилиадиса (MSRV) предназначена для селективного обогащения и выделения Salmonella из пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции.

Типы исследуемых образцов:

• пищевые продукты;
• корма для животных;
• образцы окружающей среды в зоне производства и обращения пищевой продукции;
• образцы, полученные на этапе первичного производства, включая фекалии животных, пыль и смывы.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 6579-1:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd.:2020.

Состав среды

Спецификация ISO — MSRV

Состав на 1 л среды:

Конечный pH после стерилизации при 20–25 °C: 5,10–5,40.

Основа модифицированной полутвёрдой среды Раппапорта—Вассилиадиса (MSRV)

Состав на 1 л среды:

Конечный pH после стерилизации при 20–25 °C: 5,10–5,40.

Добавка после автоклавирования

Содержимое флакона FD193:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

• Биопептон эквивалентен ферментативному гидролизату тканей животного и растительного происхождения.
• Ациказа эквивалентна кислотному гидролизату казеина.

Принцип действия и интерпретация

Основа полутвёрдой среды Раппапорта—Вассилиадиса разработана на основе состава, описанного DeSmedt и соавторами, для выявления подвижных видов Salmonella в пищевых продуктах и образцах окружающей среды.

Биопептон и ациказа обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Хлорид магния, малахитовый зелёный и новобиоцин подавляют подвижность и рост значительной части других микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Фосфат выполняет буферную функцию.

Принцип работы среды основан на способности видов Salmonella мигрировать в селективной среде, конкурируя с другими подвижными микроорганизмами. При этом от точки внесения инокулята формируется мутное кольцо или зона роста. Положительный результат характеризуется распространением серо-белой мутной зоны от места внесения капли культуры.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 39,47 г сухой среды, что соответствует эквивалентной массе обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию при перемешивании до кипения до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную основу.
4. Охладите среду до 47–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона регидратированной селективной добавки IMRV/RV (FD193).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к поверхности чашек и инкубации

Подвижность Salmonella может резко снижаться при чрезмерном высыхании поверхности агара. Перед использованием чашки должны быть хорошо высушены. При наличии видимой влаги на крышке чашки или поверхности агара влагу необходимо удалить.

Во время инкубации:

• инкубируйте чашки в аэробных условиях;
• устанавливайте чашки в вертикальном положении;
• продолжительность инкубации при 42 °C не должна превышать 24 ч.

Пробоподготовка и схема анализа

Обработка образцов выполняется в соответствии с ISO 6579-1:2017 и ISO 11133:2014, включая поправку Amd. 2018.

Предварительное обогащение

1. Внесите 25 г образца в 225 мл буферной пептонной воды M14941.
2. Инкубируйте при 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.

Селективное обогащение

1. Внесите 0,1 мл предварительно обогащённого образца в 10 мл бульона RVS M1448I или на агар MSRV M1428.
2. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Перенесите 1 мл полученной культуры в бульон MKTTn M14961.
4. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.

Выделение

1. Полученную культуру высейте на модифицированный агар XLD M031I.
2. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Одновременно выполните высев на вторую изоляционную агаровую среду.

Подтверждение

Для подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 41,5 °C ± 1 °C в течение 24 ч с добавлением селективной добавки IMRV/RV (FD193), если одну каплю культуры вносят в центр чашки со средой. Подвижность проверяют внесением капли культуры в центр чашки. При отрицательном результате через 24 ч рекомендуется дополнительная инкубация в течение 24 ± 3 ч.