Основа модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса (MSRV) HiMedia M1428I-500G (уп/500 гр)

Основа модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса (MSRV) HiMedia M1428I-500G для селективного обогащения и изоляции Salmonella из пищевых продуктов и проб окружающей среды. Состав и критерии эффективности среды соответствуют международным стандартам ISO 6579-1:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd. :2020.

Принцип измерения

Работа среды основана на способности видов Salmonella мигрировать в селективной среде, конкурируя с другими подвижными организмами, что приводит к образованию матовых гало роста. Подвижные бактерии формируют зону роста, исходящую из точки инокуляции.

Биопептон и ациказе обеспечивают азот- и углеродсодержащие вещества, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые питательные вещества. Подвижность других микроорганизмов в значительной степени подавляется селективными агентами: хлоридом магния, малахитовым зеленым и новобиоцином. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты служат буфером.

Область применения

Среда рекомендуется для анализа следующих типов образцов:

• Пищевые продукты и корма для животных.
• Образцы окружающей среды из зон производства и переработки пищевых продуктов.
• Образцы первичного производства: фекалии животных, пыль и мазки.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и обработка

Процедуры проводятся в соответствии с ISO 6579-1:2017 и ISO 11133:2014, Amd 2018.

1. Предварительное обогащение: образцы (25 г в 225 мл) помещают в буферную пептонную воду (M14941) и инкубируют при температуре 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл предварительно обогащенного образца инокулируют в 10 мл бульона RVS (M1448I) или агара MSRV (M1428) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Изоляция: 1 мл полученной культуры инокулируют в бульон MKTTn (M14961) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Затем культуру высевают на модифицированный агар XLD (M031I) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Параллельно проводится посев на второй изоляционный агар.
4. Подтверждение: для окончательного подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

Приготовление среды

1. Растворить 39,47 г сухой среды (эквивалентный вес на литр) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать при перемешивании до кипения для полного растворения компонентов.
3. ВНИМАНИЕ: Автоклавирование запрещено.
4. Охладить до 47–50 °C и асептически добавить 1 флакон регидратированного селективного дополнения IMRV/RV (FD193).
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Примечание: Подвижность Salmonella может резко снизиться при чрезмерном высыхании поверхности агара. Чашки должны быть хорошо просушены перед использованием; видимая влага на крышках или поверхности агара должна быть удалена. Инкубацию проводить аэробно в вертикальном положении не более 24 часов при 42 °C.

Технические характеристики

Состав (ISO Specification - MSRV)

Состав (Modified Semisolid Rappaport Vassiliadis Medium Base)

Добавки (вводятся после автоклавирования)

Физико-химические параметры

• Конечный pH (после стерилизации) при 20–25 °C: 5,10–5,40
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-желтого до светло-голубого цвета
• Желирование: полужидкий гель, сопоставим с 0,27 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: голубой прозрачный или слегка опалесцирующий полужидкий гель
• Тип продукта: регулярный
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 41,5 ± 1 °C в течение 24 часов с добавлением селективной добавки IMRV/RV (FD193). Подвижность проверяется путем инокуляции одной капли культуры в центр чашки. При отрицательных результатах через 24 часа рекомендуется дополнительная инкубация в течение 24 ± 3 часов.

* Соответствующие номера WDCM. При пересеве на агар XLD могут наблюдаться характерные колонии.

Ограничения и предостережения

1. Среда предназначена только для обнаружения подвижных штаммов Salmonella; неподвижные штаммы не обнаруживаются.
2. Различные организмы могут демонстрировать вариативность паттернов роста.
3. Каждая партия протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA).
4. Для окончательного подтверждения необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия хранить в сухом месте с плотно закрытой крышкой для предотвращения комкования.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Утилизация: путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.