Основа полужидкой среды IMRV HiMedia M1427-500G (уп/500 гр)

Основа полужидкой среды IMRV HiMedia M1427-500G (уп/500 гр) производства HiMedia — порошковая питательная среда с конечным pH 5,5 ± 0,2. Основа предназначена для одновременного обогащения и выделения подвижных Salmonella из пищевых продуктов и проб окружающей среды с применением селективной добавки IMRV/RV Selective Supplement (FD193).

Назначение

Основа полужидкой среды IMRV применяется для одновременного обогащения и выделения подвижных Salmonella из пищевых продуктов и проб окружающей среды.

Среда является дифференциальной: позволяет отличать подвижные формы Salmonella от неподвижных, а также выявлять Salmonella в смешанной культуре различных грамотрицательных микроорганизмов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация

Малахитовый зелёный в составе среды и новобиоцин, добавляемый в составе селективной добавки IMRV/RV Selective Supplement (FD193), избирательно подавляют большинство грамположительных микроорганизмов.

Salmonella обычно сохраняет жизнеспособность при несколько повышенном осмотическом давлении, обусловленном присутствием MgCl₂, растёт при слегка пониженном pH и более устойчива к малахитовому зелёному по сравнению с другими бактериями.

Сахароза, лактоза и бромкрезоловый пурпурный обеспечивают дифференциацию Salmonella от микроорганизмов, ферментирующих лактозу и сахарозу.

Аммонийно-железные квасцы и тиосульфат натрия служат индикаторами образования H₂S. Некоторые виды бактерий восстанавливают тиосульфат до сероводорода. H₂S взаимодействует с ионами железа с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа, что проявляется появлением серовато-чёрной окраски в центре колонии.

Ферментативный гидролизат казеина и пептический перевар животной ткани обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, а также другими необходимыми для роста питательными веществами.

Фосфат придаёт среде высокую буферную ёмкость. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Совокупность этих факторов обеспечивает селективность среды при выделении Salmonella.

Среда обогащает культуру Salmonella, а полужидкая консистенция позволяет отличать подвижные формы Salmonella от неподвижных по характеру распространения роста.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 51,2 г основы в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию при перемешивании до кипения до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду и не допускайте перегрева.
4. Охладите среду до 45 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки IMRV/RV Selective Supplement (FD193).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к чашкам и инкубации

Подвижность Salmonella может существенно снижаться, если поверхность агара становится слишком сухой. Перед использованием чашки должны быть хорошо подсушены.

При появлении видимой влаги на крышке чашки или поверхности агара влагу необходимо удалить.

Инкубируйте чашки в аэробных условиях, в вертикальном положении, не более 24 ч при 42 °C.

Методика определения подвижности

Культурные характеристики оценивают после инкубации при 42–43 °C в течение 18–24 ч в среде с добавленной селективной добавкой IMRV/RV Selective Supplement (FD193).

1. Внесите одну каплю культуры в центр поверхности среды в чашке.
2. Инкубируйте чашку в аэробных условиях в вертикальном положении при 42–43 °C в течение 18–24 ч.
3. Оцените распространение роста от точки инокуляции.
4. Подвижность проверяют по характеру распространения роста после внесения капли культуры в центр чашки.

Культуральные характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до голубого цвета.
• Гелеобразование: полужидкий гель, сопоставимый с 0,27 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный полужидкий гель тёмно-зелёного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,12 % при 25 °C.
• pH: 5,30–5,70.
• Конечный pH при 25 °C: 5,5 ± 0,2.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа.
• Масса упаковки: 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Расход основы: 51,2 г на 1000 мл дистиллированной воды.
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 5,12 %.
• Конечная кислотность среды: pH 5,5 ± 0,2 при 25 °C.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Ограничения применения

• Среду нельзя автоклавировать.
• Нельзя допускать перегрева при растворении.
• Избыточное высушивание поверхности агара может значительно снизить подвижность Salmonella.
• При наличии видимой влаги на крышке чашки или поверхности агара влагу необходимо удалить.
• Инкубация должна проводиться в аэробных условиях, в вертикальном положении и не дольше 24 ч при 42 °C.

Селективная добавка

Для приготовления и проведения анализа используется восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки IMRV/RV Selective Supplement (FD193) на 1000 мл приготовленной среды.

Сравнительный технический контекст

В отличие от обычных процедур обогащения, полужидкая консистенция IMRV обеспечивает дополнительную дифференциацию подвижных и неподвижных форм Salmonella по распространению роста от точки инокуляции.