HiMedia M1419-500G Агар для теста на ДНКазу с метиловым зеленым

Питательная агаризованная среда HiMedia M1419-500G «Агар для теста на ДНКазу с метиловым зеленым» производства HiMedia предназначена для выявления активности дезоксирибонуклеазы и поставляется в виде порошка массой 500 г. Среда применяется для исследования изолированных бактерий и грибов, включая идентификацию патогенных стафилококков, при хранении продукта при 10–30 °C.

Назначение

HiMedia M1419-500G рекомендована для:

• выявления активности дезоксирибонуклеазы бактерий и грибов;
• идентификации патогенных стафилококков в клинических образцах;
• исследования изолированных микроорганизмов, полученных из клинических и неклинических образцов.

Среда поддерживает рост грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Состав

Состав среды, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Реакция: реакция 4,2 % масс./об. водного раствора при 25 °C
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Принцип действия

Агар для теста на ДНКазу с метиловым зелёным выявляет способность микроорганизмов продуцировать дезоксирибонуклеазу. Фермент, выделяемый микроорганизмами, деполимеризует субстрат ДНК в питательной среде.

Метиловый зелёный связывается с высокополимеризованной ДНК с образованием стабильного зелёного комплекса при pH 7,5. По мере гидролиза ДНК метиловый зелёный высвобождается; в несвязанном состоянии при этом pH он выцветает и превращается в бесцветное соединение. В результате вокруг колоний, полос или точечных посевов микроорганизмов, продуцирующих ДНКазу, формируются прозрачные зоны на зелёном фоне среды.

Триптоза служит источником азота для микроорганизмов. Для проявления реакции не требуется добавление реагентов после инкубации.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42,05 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к образцам

Используют изолированные микроорганизмы, выделенные из клинических и неклинических образцов.

Для образцов изолированных микроорганизмов применяйте соответствующие методы сбора и обработки материала согласно принятым лабораторным руководствам. Исследуемые организмы должны находиться в чистой культуре и иметь возраст 18–24 ч.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Интерпретация результатов

Микроорганизмы, продуцирующие ДНКазу, образуют прозрачный ореол вокруг зоны роста на зелёном фоне среды. Отсутствие прозрачной зоны соответствует отрицательной реакции на активность ДНКазы.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель зелёного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция 4,2 % масс./об. водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• Тестируемые организмы должны находиться в чистой культуре.
• Возраст культуры перед исследованием должен составлять 18–24 ч.
• Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии. Порошок обладает гигроскопичностью; попадание влаги может привести к образованию комков. После каждого использования контейнер следует герметично закрывать. Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные применяемыми руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методами.

Технические характеристики

Сравнительное техническое отличие

В отличие от вариантов агаризованных сред для выявления ДНКазы, требующих добавления реагента после инкубации, HiMedia M1419-500G содержит метиловый зелёный и позволяет визуально оценивать прозрачный ореол вокруг роста без добавления реагентов.