HiMedia M1419-100G Агар для теста на ДНКазу с метиловым зеленым

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1419-100G Агар для теста на ДНКазу с метиловым зеленым — порошковый агар с конечным pH 7,3 ± 0,2. Среда предназначена для выявления дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов, включая идентификацию патогенных стафилококков в клинических образцах; тестируемые микроорганизмы должны находиться в чистой культуре возрастом 18–24 ч.

Назначение и область применения

Агар HiMedia M1419-100G с ДНК и метиловым зелёным применяют для:

• выявления дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов;
• идентификации патогенных стафилококков в клинических образцах;
• исследования изолированных микроорганизмов, выделенных из клинических и неклинических образцов.

Среда поддерживает рост грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Состав

Содержание компонентов в готовой среде:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Принцип измерения и интерпретация

Агар для теста на ДНКазу используют для обнаружения дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов, особенно для идентификации патогенных стафилококков.

Микроорганизмы, продуцирующие ДНКазу, образуют прозрачную зону вокруг роста на фоне зелёной среды. Добавление реагента не требуется.

Принцип действия основан на модификации методики выявления бактерий, продуцирующих ДНКазу. Триптоза служит источником азота для микроорганизмов. ДНКаза, вырабатываемая микроорганизмами, деполимеризует субстрат ДНК в питательной среде.

Метиловый зелёный связывается с высокополимеризованной ДНК и образует стабильный зелёный комплекс при pH 7,5. По мере гидролиза ДНК метиловый зелёный высвобождается; в несвязанном состоянии при этом pH он бледнеет и превращается в бесцветное соединение. В результате вокруг колоний либо мест нанесения полоски или капли инокулята формируются чёткие прозрачные зоны на фоне зелёной среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,05 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа или 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к образцам и обращение с ними

Для тестирования используют изолированные микроорганизмы из клинических и неклинических образцов.

При сборе и обработке образцов изолированных микроорганизмов необходимо применять соответствующие методики и процедуры, установленные лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Тестируемые микроорганизмы должны находиться в чистой культуре, возраст культуры — 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

В чашках Петри образуется зелёный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,2 % масса/объём при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Значение pH

7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Меры предосторожности

• Только для in vitro диагностики.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Технические характеристики

Основные параметры

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1419-100G
• Назначение изделия: агар для выявления дезоксирибонуклеазной активности
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Расход при приготовлении: 42,05 г на 1000 мл воды
• Температура стерилизации: 121 °C
• Время стерилизации: 15 мин
• Давление при автоклавировании: 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа или 1,03 бар
• Температура охлаждения перед разливом: 45–50 °C

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

По сравнению с агаром для теста на ДНКазу без индикатора метиловый зелёный позволяет визуально выявлять зоны гидролиза ДНК непосредственно на зелёном фоне среды без добавления реагента после инкубации.