Селективная и дифференциальная агаровая основа HiMedia M1417F-500G Основа HiCrome агара для листерий производства HiMedia предназначена для быстрого прямого выявления видов Listeria и имеет конечный pH 7,3 ± 0,1. Основа применяется для анализа пищевых и клинических образцов, включая кровь, с предположительной идентификацией Listeria monocytogenes через 24–48 ч после предварительного обогащения.

Назначение

HiCrome® Listeria Agar Base — селективная и дифференциальная агаровая среда для быстрого и прямого выявления видов Listeria. Среду также применяют для исследования клинических образцов.

Основные типы образцов:

• клинические образцы — кровь;
• пищевые образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

— эквивалент мясного экстракта.

Принцип обнаружения и интерпретация

HiCrome® Listeria Agar Base, Modified представляет собой модификацию формул Notermans и соавторов и Mengaud и соавторов для выявления видов Listeria в пищевых продуктах. Метод также соответствует методике FDA BAM 1998.

Предположительная идентификация Listeria monocytogenes выполняется в течение 24–48 ч после предварительного обогащения. Обнаружение основано на специфической хромогенной регистрации активности β-глюкозидазы и ферментации D-ксилозы:

• виды Listeria гидролизуют очищенный хромогенный субстрат, в результате чего образуются колонии синего цвета;
• активность β-глюкозидазы считается специфичной для видов Listeria; другие микроорганизмы не используют хромогенный субстрат и формируют белые колонии;
• дифференциация видов Listeria основана на способности ферментировать D-ксилозу;
• колонии L. ivanovii имеют синюю окраску с жёлтым ореолом и дают положительную реакцию на D-ксилозу;
• колонии L. monocytogenes и L. innocua имеют синюю окраску без жёлтого ореола и дают отрицательную реакцию на D-ксилозу.

Функции компонентов среды:

• пептон, дрожжевой экстракт и экстракт HM обеспечивают азотистые соединения, витамины группы B и другие необходимые питательные вещества для роста;
• D-ксилоза является ферментируемым углеводом;
• феноловый красный используется как индикатор;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• хлорид лития и селективная добавка HiCrome® Listeria Selective Supplement (FD181) подавляют рост большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, дрожжей и плесневых грибов.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 36,63 г основы и суспендируйте в 500 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки HiCrome® Listeria Selective Supplement (FD181).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образца и обращение с материалом

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо простерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Из-за различий в питательных потребностях некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• В зависимости от штамма возможны небольшие variations окраски колоний.
• Для подтверждения результата необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция 6,72%-ного масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки HiCrome® Listeria Selective Supplement (FD181).

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения основы: 15–25 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Для обеспечения заявленных характеристик рекомендуется использовать продукт в пределах указанного срока годности.
• При получении продукта храните его при