М-ТЕС агар для технологии мембранных фильтров HiMedia M1391-500G (уп/500 гр)

Питательная среда М-ТЕС агар для технологии мембранных фильтров HiMedia M1391-500G (уп/500 гр) производства HiMedia — агаровая среда для микробиологического анализа воды с фасовкой 500 г. Среда применяется для выделения, дифференциации и быстрого количественного определения термотолерантных Escherichia coli методом мембранной фильтрации с последующим подтверждением на мочевинном субстрате.

Назначение и область применения

М-ТЕС агар предназначен для выделения, дифференциации и быстрого количественного определения термотолерантных Escherichia coli из воды методом мембранной фильтрации.

Среда применяется при оценке микробиологического качества рекреационной воды совместно с мочевинным субстратом. Термотолерантные Escherichia coli используются как индикатор фекального загрязнения воды.

Методика позволяет количественно определить E. coli в течение 24 ч без пересевов и идентификации выделенных изолятов.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эксплуатационных характеристик среды.

Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация результатов

Принцип метода основан на способности термотолерантных E. coli расти при повышенной температуре и образовывать индол из триптофана. Определение продукции индола в сочетании с процедурами определения наиболее вероятного числа требует дополнительной питательной среды и увеличивает время инкубации.

При использовании М-ТЕС агара мембранный фильтр после фильтрации пробы асептически помещают рабочей поверхностью вверх на поверхность агара. Чашки инкубируют при 44,5 ± 0,5 °C. После инкубации фильтры асептически переносят на стерильные абсорбирующие ватные прокладки, насыщенные мочевинным субстратом, то есть мочевиной, в объёме приблизительно 2 мл.

Мочевинный субстрат готовят растворением 2 г мочевины и 0,01 г фенолового красного в 100 мл дистиллированной воды с доведением pH до 5,0 ± 0,2.

Отрицательная уреазная реакция или образование колоний жёлтого либо жёлто-коричневого цвета через 15–20 мин после переноса фильтра на мочевинный субстрат подтверждают наличие термотолерантных E. coli.

Функции компонентов

• Протеозопептон и дрожжевой экстракт: источники азота, углерода, аминокислот и витаминов.
• Фосфатные соли калия: буферная система среды.
• Лактоза: ферментируемый источник углеводов.
• Бромкрезоловый пурпурный и бромфеноловый красный: индикаторы.
• Лаурилсульфат натрия и дезоксихолат натрия: ингибиторы грамположительных бактерий.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 45,26 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45 °C.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика проведения анализа методом мембранной фильтрации

1. Проведите фильтрацию исследуемой воды через мембранный фильтр.
2. Асептически поместите фильтр рабочей поверхностью вверх на поверхность М-ТЕС агара.
3. Инкубируйте чашки при 44,5 ± 0,5 °C.
4. После инкубации асептически перенесите мембранные фильтры на стерильные абсорбирующие ватные прокладки, насыщенные приблизительно 2 мл мочевинного субстрата.
5. Приготовьте мочевинный субстрат растворением 2 г мочевины и 0,01 г фенолового красного в 100 мл дистиллированной воды; доведите pH раствора до 5,0 ± 0,2.
6. Выдержите фильтр на субстрате 15–20 мин.
7. Интерпретируйте отрицательную уреазную реакцию или образование жёлтых либо жёлто-коричневых колоний как подтверждение присутствия термотолерантных E. coli.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель тёмно-фиолетового цвета с красноватым оттенком.

Реакция среды

Реакция 4,53%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 2 ч, а затем при 44,5 ± 0,5 °C в течение 22 ч.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар.
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.
• Рабочая концентрация при приготовлении: 45,26 г/л.
• Фасовка: 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой таре.
• Условия хранения приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Комплект поставки

• М-ТЕС агар HiMedia M1391-500G, 500 г.