Агар для изучения морфологии дрожжей HiMedia M138-100G (уп/100 гр)

Агаризованная питательная среда Агар для изучения морфологии дрожжей HiMedia M138-100G (уп/100 гр) предназначена для классификации дрожжей по колониальным и клеточным морфологическим признакам. Среда применяется для исследования клеточной морфологии, образования мицелия и псевдомицелия, а также других культуральных характеристик при работе с чистыми изолятами.

Назначение

Среда рекомендована для классификации дрожжей на основании характеристик колоний и морфологии клеток.

Тип образца: чистые изоляты.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Конечный pH при 25 °C: 5,6 ± 0,2.

Происхождение: химически определённая среда HiCynth™.

Тип продукта: стандартный.

Физическая форма: порошок.

Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).

Принцип и интерпретация

Дрожжи широко распространены в окружающей среде и встречаются на фруктах, овощах и растительных материалах. Дрожжи представляют собой одноклеточные эукариотические почкующиеся клетки, обычно округлой или овальной формы; реже клетки имеют удлинённую или неправильную форму. Колонии дрожжей могут иметь гладкую или морщинистую поверхность и кремообразный вид.

Агар для изучения морфологии дрожжей сформулирован по Викерхэму. Среда обогащена и содержит факторы роста, необходимые дрожжам. Среда применяется для исследования:

• клеточной морфологии;
• образования мицелия;
• образования псевдомицелия;
• других культуральных характеристик.

Компоненты среды обеспечивают дрожжи источниками углерода и азота, аминокислотами, витаминами и микроэлементами в виде солей.

Чашки со средой инокулируют по технике Долманса. После инкубации в течение 72–96 ч исследуют под микроскопом морфологию вегетативных клеток, сняв рост с точечных посевов и штриха без предметного стекла. Также под микроскопом исследуют зоны среды под предметными стеклами на предмет образования мицелия или псевдомицелия. Дополнительно оценивают морфологию колоний.

Методика приготовления и инокуляции

1. Суспендируйте 34,75 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа или 1,03 бар, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри слоем толщиной 1,5 мм.
6. Оставьте поверхность среды подсыхать на 1–2 дня при комнатной температуре.
7. Используйте небольшой объём инокулята.
8. Выполните один штриховой посев на одном краю чашки.
9. Выполните два точечных посева на противоположной стороне чашки, рядом с другими сторонами пластины.
10. Поместите два стерильных предметных стекла: одно — на центральный участок штриха, второе — на один из двух точечных посевов.
11. После инкубации в течение 72–96 ч снимите рост с точечных посевов и штриховой зоны без предметного стекла.
12. Исследуйте под микроскопом морфологию вегетативных клеток.
13. Исследуйте под микроскопом зоны среды под предметными стёклами для выявления мицелия или псевдомицелия.
14. Оцените морфологию колоний.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 25–30 °C в течение 6–7 суток.

• Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид: однородный свободносыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,8%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета, слегка опалесцирующий.

Реакция: реакция 3,47%-ного водного раствора при 25 °C.

pH по реакции: 5,6 ± 0,2.

Диапазон pH: 5,40–5,80.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 2–8 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Условия хранения: сухое проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии.
• Плотное закрытие необходимо для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Требования к образцам и обращению

Для образцов чистых изолятов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Используйте небольшой объём инокулята, выполняйте один штриховой посев и два точечных посева рядом с другими сторонами чашки. Соблюдение этой схемы инокуляции необходимо для оценки клеточной морфологии, образования мицелия и псевдомицелия.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указания