Основа среды Виллиса и Хобба HiMedia M1375-500G (уп/500 гр)

Основа среды Виллиса и Хобба HiMedia M1375-500G (уп/500 г) предназначена для изоляции и идентификации бактерий рода Clostridium из пищевых продуктов. Среда позволяет дифференцировать Clostridium perfringens на основании ферментации лактозы и лецитиназной реакции в яичном желтке.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Виллиса и Хобба разработана для идентификации Clostridium perfringens по способности ферментировать лактозу и проявлять лецитиназную активность в присутствии яичного желтка. Состав разработан в соответствии с Индийским стандартом IS: 5887 (Part-IV) 1976.

Техническая роль компонентов:

• Пептический перевариватель тканей животных и мясной экстракт: источники азота и факторов роста.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического баланса.
• Лактоза: источник углерода и энергии.

Интерпретация результатов:

• Виды Clostridium, такие как C. perfringens и C. botulinum, образуют опалесцирующую зону вокруг колоний в средах с яичным желтком.
• Для различных типов C. botulinum характерно образование осадка и «жемчужного» (иризирующего) слоя, прилегающего к колониям и покрывающего их (липазная активность), что используется для дифференциации и изоляции данной группы бактерий.
• Вокруг протеолитических колоний развиваются зоны просветления.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 23,51 г основы среды в 420 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 50–55 °C.
5. Асептически добавьте следующие компоненты:
   • 15 мл эмульсии яичного желтка (FD045);
   • 60 мл стерильного раствора обезжиренного молока (10 % раствор готовится из порошка обезжиренного молока и стерилизуется отдельно в автоклаве при 121 °C в течение 5 минут);
   • содержимое одной ампулы добавки Виллиса и Хобба (Willis and Hobbs Supplement, FD156).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления эмульсии желтка и раствора молока: розово-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 4,7 % (масса/объем) водного раствора основы при 25 °C составляет 7,0 ± 0,2 (диапазон 6,80–7,20).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов с добавлением эмульсии яичного желтка (FD045), стерильного раствора обезжиренного молока и добавки Виллиса и Хобба (FD156).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.