Основа среды Виллиса и Хобба HiMedia M1375-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды Виллиса и Хобба HiMedia M1375-500G (уп/500 гр) — порошковая основа с конечным pH 7,0 ± 0,2. Основа применяется для выделения и идентификации бактерий рода Clostridium из пищевых продуктов с последующим добавлением эмульсии яичного желтка, стерильного обезжиренного молока и добавки Willis and Hobbs.

Назначение

Основа среды Виллиса и Хобба используется для выделения и идентификации Clostridium из пищевых продуктов. Среда предназначена, в частности, для идентификации Clostridium perfringens по лецитиназной реакции в присутствии яичного желтка и ферментации лактозы.

Изделие зарегистрировано по сертификату ФСЗ 2009/03709.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров работы.

• Происхождение: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2

Методика приготовления

1. Суспендируйте 23,51 г основы в 420 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50–55 °C.
5. В асептических условиях добавьте:
   • 15 мл эмульсии яичного желтка Egg Yolk Emulsion (FD045);
   • 60 мл стерильного раствора обезжиренного молока;
   • восстановленное содержимое одного флакона добавки Willis and Hobbs Supplement (FD156).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Приготовление раствора обезжиренного молока

10%-ный раствор готовят из сухого обезжиренного молока и стерилизуют отдельно автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 5 мин.

Принцип действия и интерпретация результатов

Споры бактерий рода Clostridium обладают высокой термоустойчивостью, поэтому могут сохраняться после неполной термической обработки пищевых продуктов и становиться причиной пищевых отравлений. Выделение и идентификация таких микроорганизмов из пищевых продуктов имеют диагностическое значение.

Основа среды Виллиса и Хобба, разработанная Willis и Hobbs, применяется для идентификации Clostridium perfringens по двум признакам:

• лецитиназной реакции в среде с яичным желтком;
• ферментации лактозы.

Пептический перевар животной ткани и мясной экстракт обеспечивают азотистые соединения и другие факторы роста. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Лактоза служит источником энергии и углерода.

В средах с яичным желтком виды Clostridium, включая C. perfringens и C. botulinum, образуют вокруг колоний опалесцирующую зону. Образование осадка в среде, а также слоя с «перламутровым» (иридисцентным) видом, прилегающего к колониям и покрывающего их, связано с липазной активностью различных типов C. botulinum на агаровой среде с яичным желтком и используется как дополнительный признак дифференциации и выделения этой группы бактерий. Вокруг протеолитических колоний образуются зоны просветления.

Среда приготовлена в соответствии с требованиями индийского стандарта IS: 5887 (часть IV), 1976.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от бледно-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• После добавления стерильной эмульсии яичного желтка и стерильного раствора обезжиренного молока: непрозрачный гель розовато-красного цвета в чашках Петри.

Реакция

Реакция 4,7%-ного водного раствора основы при 25 °C.

• pH: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением эмульсии яичного желтка Egg Yolk Emulsion (FD045), стерильного раствора обезжиренного молока и добавки Willis and Hobbs Supplement (FD156).

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Технические характеристики