HiMedia M1360A-500G Модифицированный агар Кундрата

Микробиологическая агаризованная питательная среда HiMedia M1360A-500G Модифицированный агар Кундрата в порошке предназначена для качественного выявления остатков антибиотиков, сульфаниламидов и других химиотерапевтических веществ в мясе и пищевых продуктах животного происхождения. Среда применяется в агардиффузионном тесте с использованием спор Bacillus stearothermophilus; тест не предназначен для выявления моющих средств, дезинфектантов и консервантов.

Назначение

Модифицированный агар Кундрата HiMedia M1360A-500G предназначен для рутинного качественного определения остатков антибиотиков, сульфаниламидов и других химиотерапевтических веществ в мясе и других пищевых продуктах животного происхождения.

Метод подходит для проведения быстрого или длительного теста на наличие ингибирующих веществ. Моющие средства, дезинфицирующие средства и консерванты данным тестом не выявляются.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Принцип измерения и интерпретация

Метод разработан Kundrat и выполняется в форме агардиффузионного теста с использованием суспензии спор Bacillus stearothermophilus.

Пептон, желатин, крахмал и глюкоза в составе среды обеспечивают Bacillus stearothermophilus источниками азота, углеродными соединениями и другими необходимыми питательными веществами.

Тест-организм ферментирует глюкозу и сахарозу в среде с образованием кислоты. В результате бромкрезоловый пурпурный изменяет окраску с фиолетовой на жёлтую. Ингибирующее действие проявляется в виде зоны просветления вокруг места нанесения образца, при этом исходная фиолетовая окраска индикатора сохраняется.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа; 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри или используйте по назначению.

Методика проведения анализа

После автоклавирования охладите среду до 50–60 °C. К каждым 200 мл среды добавьте содержимое одной ампулы LA420 с суспензией спор Bacillus stearothermophilus, перемешайте и разлейте по 5 мл в чашки Петри диаметром 90 мм в соответствии с DIN 10182, часть 1.

Фильтровальные диски диаметром 6 мм пропитывают жидким образцом либо помещают на срезы органов — почки, печени — или мышечной ткани. Затем диски осторожно прижимают к поверхности питательной среды. На каждую чашку помещают не более 6 дисков.

Рекомендуется предварительно инкубировать чашки в течение 135 мин при 65 °C. Укладки чашек стопкой следует избегать, чтобы обеспечить равномерное воздействие температуры.

Быстрый тест

1. После размещения дисков на предварительно инкубированных чашках дополнительно инкубируйте их в течение 45 мин при 65 °C без предварительной диффузии.
2. При быстром тесте предварительная инкубация инокулированных чашек ускоряет рост тест-организма, поэтому зоны ингибирования появляются быстрее после нанесения образцов.
3. Результаты можно регистрировать после 15–25 мин инкубации в среде, которая в этот момент мутная вследствие роста спор.
4. После 45 мин инкубации зоны ингибирования становятся более выраженными из-за изменения окраски культуральной среды.
5. Образование зоны ингибирования считают положительным результатом.

Длительный тест

1. Предварительную инкубацию чашек не проводят.
2. После размещения фильтровальных дисков на чашках инкубируйте их в течение 3 ч при 65 °C без предварительной диффузии.
3. При длительном тесте положительным результатом считают только зону ингибирования диаметром более 10 мм.
4. Если отчётливое изменение окраски не произошло через 45 мин или 3 ч, допускается продолжить инкубацию.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого с зеленоватым оттенком.

Состояние: однородный, свободно текущий порошок.

Желирование

Гель плотный, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-фиолетовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 4,04%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики регистрируют после инкубации при 65 °C в течение 18–24 ч. В таблице также приведены результаты роста через 3–3,5 ч при 65 °C и диаметры зон ингибирования для указанных антибиотиков.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE
• Температура транспортирования и хранения: 10–30 °C
• Температура хранения закрытой упаковки: ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Условия хранения и срок годности

Хранить порошок в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду хранить при 2–8 °C. Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Методическое отличие

Модифицированный агар Кундрата предусматривает два режима анализа остатков ингибирующих веществ: быстрый тест с инкубацией 45 мин после предварительной инкубации чашек и длительный тест с инкубацией 3 ч без предварительной инкубации.

Сведения о методе

Методика основана на агардиффузионном тесте Kundrat и выполняется с суспензией спор Bacillus stearothermophilus. Для проведения анализа используется режим, описанный в DIN 10182, часть 1.