Агар Кюндрат HiMedia M1360-500G (уп/500 гр)

Питательная агаровая среда Агар Кюндрат HiMedia M1360-500G (уп/500 гр) с содержанием агара 10,000 г/л предназначена для качественного выявления остатков антибиотиков и других химиотерапевтических средств в продукции животного происхождения. Агар Кюндрат применяется методом агаровой диффузии для анализа кормов, мяса, мышечной ткани, печени и почек; положительный результат определяется по образованию зон подавления роста микроорганизмов.

Назначение

Агар Кюндрат используют для рутинного качественного выявления остатков антибиотиков и других химиотерапевтических средств в пищевой продукции животного происхождения.

Среда предназначена для:

• выявления антимикробных остатков в препаратах кормов животного происхождения с использованием Bacillus stearothermophilus (LA840);
• выявления антимикробных остатков в образцах мяса и органов с использованием суспензий спор Bacillus subtilis (BGA);
• анализа образцов мышечной ткани, печени и почек.

Тест не предназначен для выявления моющих средств, дезинфицирующих средств и консервантов.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эксплуатационных характеристик.

Технические характеристики

• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Масса навески: 40,41 г на 1000 мл воды
• Температура стерилизации: 121 °C
• Давление стерилизации: 15 фунтов/кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар)
• Время стерилизации: 15 мин
• Температура охлаждения среды перед внесением микроорганизма: 50–60 °C
• Диаметр фильтровальных дисков: 6 мм
• Максимальное количество дисков на чашку: 6
• Температура инкубации: 65 °C
• Варианты продолжительности инкубации: 45 мин или 3 ч
• Критерий положительного результата при инкубации 3 ч: зона подавления диаметром более 10 мм

Приготовление питательной среды

1. Суспендируйте 40,41 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар), температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Тщательно перемешайте среду.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип измерения и интерпретация результатов

Тест выполняют в форме агародиффузионного анализа. Ингибирующие вещества, присутствующие в образце, образуют вокруг нанесённой пробы зоны, свободные от роста бактерий.

Для выявления остатков антимикробных средств в кормах используют ампулу с тестовым микроорганизмом Bacillus stearothermophilus (LA840). Для выявления антимикробных остатков в мясе и образцах органов применяют суспензии спор Bacillus subtilis (BGA).

Присутствие химиотерапевтических средств определяется по образованию ореолов или зон подавления роста вокруг диска с образцом.

При дальнейшем инкубировании тестовый микроорганизм ферментирует глюкозу, содержащуюся в среде, с образованием кислоты. Кислота вызывает изменение цвета бромкрезолового пурпурного на жёлтый. Только зона подавления роста сохраняет исходный фиолетовый цвет индикатора.

Образование зоны подавления роста рассматривается как положительный результат. При варианте инкубации в течение 3 ч положительными считают только зоны подавления диаметром более 10 мм. Если выраженное изменение цвета не произошло через 45 мин или 3 ч, инкубацию можно продлить.

При быстром тесте зоны подавления начинают проявляться через 15–25 мин инкубации в среде, которая в остальном мутнеет вследствие роста спор. После 45 мин инкубации зоны подавления становятся более различимыми из-за изменения цвета питательной среды.

Методика проведения анализа

1. После автоклавирования охладите среду до 50–60 °C.
2. Добавьте содержимое одной ампулы Bacillus stearothermophilus (LA840) в каждые 200 мл среды.
3. Перемешайте среду.
4. Разлейте инокулированную среду по чашкам Петри.
5. Пропитайте фильтровальные диски диаметром 6 мм жидким образцом либо разместите диски на срезах органов — почки, печени — или мышечной ткани.
6. Слегка прижмите диски к поверхности питательной среды. На одну чашку допускается помещать до 6 дисков.
7. Выберите один из рекомендуемых вариантов постановки теста.

Быстрый тест с инкубацией 45 мин

1. Предварительно инкубируйте чашки с внесённым тестовым микроорганизмом.
2. Разместите диски с образцами на предварительно инкубированных чашках.
3. Инкубируйте чашки ещё 45 мин при 65 °C.
4. Проводите инкубацию без предварительной диффузии.

При быстром тесте зоны подавления могут становиться видимыми уже через 15–25 мин инкубации.

Тест с инкубацией 3 ч

1. Не проводите предварительную инкубацию чашек.
2. Разместите фильтровальные диски с образцами на поверхности среды.
3. Инкубируйте чашки 3 ч при 65 °C.
4. Проводите инкубацию без предварительной диффузии.

Для положительного результата при этом варианте учитывают зоны подавления диаметром более 10 мм.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет порошка: от кремового до жёлтого с зеленоватым оттенком.

Состояние порошка: однородный, сыпучий.

Желирование

Гель должен быть плотным, сопоставимым с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-фиолетового цвета.

Реакция среды

• Условия определения: водный раствор концентрацией 4,04 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 65 °C в течение 18–24 ч.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Российская регистрация

• Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03707.
• Назначение изделия: агар.