Питательная микробиологическая среда Агар ECD с MUG HiMedia M1358-500G (уп/500 гр) предназначена для выявления Escherichia coli по флуоресценции в УФ-свете и положительной реакции на индол при конечном pH 7,0 ± 0,2. Агар ECD с MUG применяют для анализа пищевых, молочных и водных проб, при этом часть штаммов E. coli может не давать флуоресценцию и требует дополнительных биохимических тестов.

Назначение

Среда рекомендована для выявления Escherichia coli по флуоресценции в УФ-свете и положительной реакции на индол с одновременным подавлением сопутствующей кишечной микрофлоры.

Тип образцов:

• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• вода.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда EC разработана Hajna и Perry для совершенствования методов выявления колиформных бактерий и Escherichia coli. Feng и Hartman разработали ускоренный метод определения E. coli с использованием 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида (MUG) в лаурилтриптозном бульоне. Среда EC с MUG приготовлена в соответствии с формулой, установленной Агентством по охране окружающей среды США, и стандартными методами анализа воды и пищевых продуктов.

Назначение компонентов:

• триптон обеспечивает среду азотом, витаминами и аминокислотами;
• лактоза служит источником углерода;
• смесь желчных солей является селективным агентом, подавляющим грамположительные бактерии, особенно бациллы и фекальные стрептококки;
• дикалий гидрофосфат и дикалий дигидрофосфат выполняют функцию буферных компонентов;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• триптофан служит субстратом для реакции на индол;
• Escherichia coli продуцирует фермент глюкуронидазу, который гидролизует MUG с образованием флуорогенного продукта, обнаруживаемого под длинноволновым УФ-излучением с длиной волны 366 нм.

Для определения Escherichia coli водную пробу фильтруют через мембранный фильтр, после чего мембрану помещают на агар ECD с MUG и инкубируют в течение ночи. После инкубации наличие флуоресценции проверяют под УФ-светом. На колонии наносят каплю реактива Ковача для определения индола R008. Вокруг индолположительных колоний образуется красная зона. Колонии, положительные по MUG и по реакции на индол, подсчитывают как Escherichia coli.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 53,07 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами согласно установленным методическим руководствам.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методическим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция 5,3 % водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее организм обозначался как Enterbacter aerogenes.

Ограничения метода

1. Некоторые штаммы E. coli являются MUG-отрицательными и не флуоресцируют под УФ-светом.
2. Для полной идентификации необходимо выполнить биохимические тесты.

Условия хранения и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости, а приготовленную среду — при температуре 20–30 °C.

Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке. После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При работе с образцами и культурами соблюдайте надлежащие микробиологические лабораторные практики. При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Оценка рабочих характеристик

Раб