Агар ECD с MUG HiMedia M1358-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Агар ECD с MUG HiMedia M1358-500G (производство HiMedia) предназначена для выявления Escherichia coli по флуоресценции в УФ-свете и положительному индольному тесту. Среда обеспечивает подавление сопутствующей кишечной флоры; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• пробы воды;
• пищевые продукты и молочные продукты.

Принцип измерения и интерпретация

Среда EC (E. coli Medium), разработанная Хайной и Перри, была усовершенствована для более эффективного обнаружения колиформных бактерий и Escherichia coli. В данной модификации используется 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид (MUG) согласно методикам Агентства по охране окружающей среды США (EPA) и стандартным методам анализа воды и пищевых продуктов.

Роль компонентов

• Триптон: источник азота, витаминов и аминокислот.
• Лактоза: источник углерода.
• Смесь желчных солей: селективный агент, подавляющий рост грамположительных бактерий, в частности бацилл и фекальных стрептококков.
• Гидрофосфат калия и дигидрофосфат калия: буферные агенты.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• MUG: субстрат для фермента глюкуронидазы, вырабатываемого E. coli. В результате гидролиза MUG образуется флуорогенный продукт, обнаруживаемый под воздействием длинноволнового УФ-излучения (366 нм).
• Триптофан: субстрат для проведения реакции на индол.

Методика проведения анализа

1. Образец воды фильтруют через мембранные фильтры.
2. Мембраны помещают на поверхность агара ECD MUG и инкубируют в течение ночи.
3. После инкубации проверяют наличие флуоресценции под УФ-лампой.
4. На колонии наносят каплю индольного реагента Ковакса (R008).
5. Результаты:
   • Положительная реакция на индол характеризуется образованием красной зоны вокруг колонии.
   • Колонии, одновременно положительные по MUG (флуоресцирующие) и по индолу, подсчитываются как E. coli.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендировать 53,07 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность: желтый гель, от прозрачного до слегка опалесцирующего.
• Реакция: pH 7,0 ± 0,2 для 5,3% (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ограничения и предостережения

• Некоторые штаммы E. coli могут быть MUG-отрицательными и не флуоресцировать под УФ-светом.
• Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• При работе с образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.