Основа агара М-СР для клостридий HiMedia M1354-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Основа агара М-СР для клостридий HiMedia M1354-500G (уп/500 гр), соответствующая ГОСТ Р 54354-2011. Рекомендована для изоляции и количественного определения Clostridium perfringens в пробах воды с использованием метода мембранной фильтрации.

Область применения

Среда предназначена для анализа проб воды и пищевых продуктов. Применяется для выделения и подсчета бактерий Clostridium perfringens, которые являются одной из основных причин пищевых отравлений и желудочно-кишечных заболеваний.

Принцип измерения

Основа агара М-СР разработана по формуле Армона и Пэймента.

• Питательные компоненты: триптоза и экстракт дрожжей обеспечивают азотистые и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины, минералы и другие факторы роста. Сахароза служит ферментируемым углеводом.
• Индикация и селективность: бромкрезоловый пурпурный выступает в роли pH-индикатора. Индоксил-β-D-глюкозид является хромогенным субстратом для β-D-глюкозидазы (целлобиозы).
• Подавление микрофлоры: добавление D-циклосерина и полимиксина B (селективные добавки) подавляет рост сопутствующей неклостридиальной микрофлоры, позволяя анализировать как вегетативные клетки, так и споры клостридий. Дополнительная селективность обеспечивается инкубацией в анаэробных условиях.

Интерпретация результатов: Жёлтые колонии (отрицательные по целлобиозе), которые при воздействии паров аммиака в течение 30 секунд приобретают цвет от «старой розы» до розово-красного, считаются предполагаемыми C. perfringens. В связи с возможными трудностями в дифференциации цвета, для подтверждения отбирают как типичные (жёлтые $\to$ розовые), так и атипичные колонии (зелёные или остающиеся жёлтыми после паров аммиака). Подтверждение проводится с помощью тестов на восстановление сульфита, определение грамположительности, способности к споруляции, неподвижности, восстановление нитратов, разжижение желатина и ферментацию лактозы.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 35,60 г сухой среды (эквивалент веса среды для 485 мл) в 485 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки M-CP Selective Supplement I (FD153) и 1 флакона M-CP Selective Supplement II (FD154) ИЛИ содержимое 1 флакона модифицированной добавки M-CP Selective Supplement II, Modified (FD154A).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Сбор и обработка образцов

• Пробы воды: сбор и обработка проводятся согласно действующим руководствам и местным стандартам.
• Пищевые продукты: сбор и обработка осуществляются в соответствии с установленными методиками.
• Утилизация: после использования загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,6 $\pm$ 0,2

Общие параметры

• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурного цвета.
• Диапазон pH: 7,40–7,80.

Контроль качества и культуральные характеристики

Инкубация проводится в анаэробной атмосфере при температуре 44 $\pm$ 1 °C в течение 21 $\pm$ 3 часов с добавлением стерильных селективных добавок (FD153 и FD154 или FD154A). Степень восстановления считается 100 % при росте бактерий на контрольной среде — соево-казеиновом дигест-агаре (Tryptone Soya Agar).

* Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Ограничения применения

1. Дифференциация цвета на среде иногда затруднена, что требует отбора как типичных, так и атипичных колоний для подтверждающих тестов.
2. В связи с вариативностью потребностей в питательных веществах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.