HiMedia·Арт.: 0049190·Арт. произв.: M1354-100G

HiMedia M1354-100G Основа M-CP агара

Name: HiMedia M1354-100G Основа M-CP агара
Brand: HiMedia
SKU: 0049190
Price: 5022 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ5 022 руб.

Сухая питательная среда HiMedia M1354-100G Основа M-CP агара для изоляции и количественного определения Clostridium perfringens. Рекомендована Директивой Совета Европейского Союза 98/83/EC для анализа проб воды методом мембранной фильтрации.

Описание

Принцип измерения и интерпретация

Среда M-CP основана на рецептуре Армона и Пеймента. Триптоза и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и минералы; сахароза служит ферментируемым углеводом. Бромкрезоловый пурпурный выступает в роли индикатора pH. Индоксил-β-D-глюкозид является хромогенным субстратом для β-D-глюкозидазы (целлобиозы).

Добавление D-циклосерина и полимиксина B (добавка FD153) подавляет рост сопутствующей неклостридиальной микрофлоры, что позволяет анализировать как вегетативные клетки, так и споры клостридий. Дополнительная селективность обеспечивается инкубацией в анаэробных условиях.

Интерпретация результатов:

Предположительные колонии C. perfringens: жёлтого цвета (целлобиоза-отрицательные), которые при воздействии паров аммиака в течение 30 секунд меняют цвет на розово-красный или цвет «старой розы».
Атипичные колонии: зелёные или остающиеся жёлтыми после воздействия аммиака.

Подтверждение предполагаемых культур C. perfringens проводится с помощью тестов на восстановление сульфита, определение грамположительных неподвижных спорообразующих палочек, восстановление нитратов, разжижение желатина, ферментацию лактозы и других биохимических тестов.

Методика приготовления и использования

Растворите 35,60 г сухой среды (эквивалент веса в 485 мл) в 485 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
Охладите среду до 45–50 °C.
В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки M-CP I (FD153) и 1 флакона селективной добавки M-CP II (FD154) ИЛИ регидратированное содержимое 1 флакона модифицированной селективной добавки M-CP II (FD154A).
Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Область применения

Пробы воды (анализ методом мембранной фильтрации).
Пробы пищевых продуктов.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Компонент	г/л
Триптоза	30,000
Дрожжевой экстракт	20,000
Сахароза	5,000
L-цистеина гидрохлорид	1,000
Сульфат магния, 7H₂O	0,100
Бромкрезоловый пурпурный	0,040
Хлорид железа, 6H₂O	0,090
Индоксил B-D-глюкозид	0,060
Агар	15,000

Конечный pH (при 25 °C): 7,6 ± 0,2
Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета
Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром
Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный или слегка опалесцирующий гель
Диапазон pH: 7,40–7,80
Происхождение компонентов: животное
Тип продукта: стандартный
Физическая форма: порошок
Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Контроль качества и культуральные характеристики

Испытания проводились после инкубации в анаэробной атмосфере при температуре 44 ± 1 °C в течение 21 ± 3 часов с добавлением стерильных добавок M-CP I (FD153) и M-CP II (FD154) или M-CP II модифицированной (FD154A). Степень восстановления считается 100 % при росте бактерий на контрольной среде — соево-казеиновом дигест-агаре (Tryptone Soya Agar).

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Тест на фосфатазу (при воздействии аммиака)
Продуктивность
Clostridium perfringens ATCC 13124	50–100	хороший-обильный	$\ge$ 50 %	положительный, жёлтые колонии (становятся розово-красными через 30 с)
Clostridium perfringens ATCC 10543	50–100	хороший-обильный	$\ge$ 50 %	положительный, жёлтые колонии (становятся розово-красными через 30 с)
Clostridium perfringens ATCC 12916	50–100	хороший-обильный	$\ge$ 50 %	положительный, жёлтые колонии (становятся розово-красными через 30 с)
Специфичность
Clostridium bifermentans NCTC 506	10³–10⁴	рост		отрицательный, синие колонии
Селективность
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge$ 10⁴	ингибирован	0 %
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge$ 10⁴	ингибирован	0 %

Ограничения и предостережения

Дифференциация по цвету на основе M-CP агара иногда затруднена, поэтому для подтверждения отбираются как типичные (жёлтые $\to$ розовые), так и атипичные (зелёные или остающиеся жёлтыми) колонии.
Из-за вариативности потребностей в питательных веществах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост на данной среде.
При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

Хранение сухой среды: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Особенности: продукт гигроскопичен, необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения образования комков.
Утилизация: контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.