Основа ХайХром агара МакКонки с сорбитом для энтеротоксигенных E.coli HiMedia M1340-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа ХайХром агара МакКонки с сорбитом для энтеротоксигенных E.coli HiMedia M1340-500G (уп/500 гр) — порошковая основа селективной среды для выделения Escherichia coli O157:H7. Применяется для анализа клинических образцов и пищевых продуктов, включая материалы, связанные с кормлением животных, с дифференциацией колоний по ферментации сорбита и активности β-D-глюкуронидазы.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения Escherichia coli O157:H7 из пищевых продуктов и кормов для животных, а также из клинических образцов кала.

• Тип питательной среды: специальная
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Соответствие: ГОСТ Р 54354-2011

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар МакКонки с сорбитом основан на рецептуре, описанной Раппапортом и Хенигом. В среде лактоза заменена сорбитом. Среда предназначена для выявления энтеропатогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, которые ферментируют лактозу, но не ферментируют сорбит; такие микроорганизмы образуют бесцветные колонии.

Штаммы Escherichia coli, ферментирующие сорбит, образуют розово-красные колонии. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из сорбита, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Escherichia coli O157:H7 признана причиной геморрагического колита. По опубликованным данным, при выявлении Escherichia coli O157:H7 на агаре МакКонки с сорбитом чувствительность метода составляла 100 %, специфичность — 85 %; среда рекомендована как средство скрининга Escherichia coli O157:H7.

Индикатор B.C. добавлен для выявления фермента β-D-глюкуронидазы, характерного для Escherichia coli. Штаммы Escherichia coli, ферментирующие сорбит и обладающие активностью β-D-глюкуронидазы, образуют на среде сине-фиолетовые колонии. Энтеропатогенные штаммы Escherichia coli O157:H7 не обладают активностью β-D-глюкуронидазы и не ферментируют сорбит, поэтому формируют бесцветные колонии.

Триптон и протеозопептон обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Кристаллический фиолетовый и желчные соли ингибируют большинство грамположительных микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Добавление цефиксим-теллуритной добавки FD147 повышает селективность среды:

• теллурит калия отбирает серогруппы Escherichia coli, ингибирует виды Aeromonas и Providencia;
• цефиксим ингибирует виды Proteus;
• Pseudomonas, если присутствует, образует на этой среде бесцветные колонии.

Для подтверждения подозрительных колоний можно выполнить оксидазный тест; результат следует регистрировать через 5–10 с.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию 25,06 г порошка в 495 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. При необходимости асептически добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки FD147 к 495 мл стерильной расплавленной охлаждённой среды перед разливом в стерильные чашки Петри.

Тип образца

• Клинические образцы: кал.
• Пищевые образцы.
• Пищевые продукты и корма для животных.

Отбор, обработка образцов и биобезопасность

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно утверждённым лабораторным руководствам.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим руководствам.

Среда предназначена для диагностики in vitro и только для профессионального применения.

Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности и правила надлежащей микробиологической практики. Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 5,01 % (масс./об.) при 25 °C:

• pH: 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости инкубацию продолжают до 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения метода

• β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli