Основа ХайХром агара МакКонки с сорбитом для энтеротоксигенных E.coli HiMedia M1340-100G (уп/100 гр)

Основа ХайХром агара МакКонки с сорбитом для энтеротоксигенных E.coli HiMedia M1340-100G (уп/100 гр) производства HiMedia. Предназначена для селективного выделения Escherichia coli O157:H7 из пищевых продуктов и материалов, связанных с кормлением животных.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на рецептуре Раппапорта и Хенига. В составе вместо лактозы используется сорбитол, что позволяет выявлять энтеропатогенные штаммы Escherichia coli O157:H7, которые ферментируют лактозу, но не ферментируют сорбитол, образуя бесцветные колонии. Штаммы E. coli, ферментирующие сорбитол, образуют розово-красные колонии: красный цвет обусловлен выработкой кислоты, поглощением нейтрального красного и последующим изменением цвета красителя при падении pH среды ниже 6,8.

Для обнаружения фермента β-D-глюкуронидазы, специфичного для Escherichia coli, в среду добавлен индикатор B.C. Штаммы E. coli, ферментирующие сорбитол и обладающие активностью β-D-глюкуронидазы, выглядят как сине-фиолетовые колонии. Энтеропатогенные штаммы E. coli O157:H7 не обладают активностью β-D-глюкуронидазы и не ферментируют сорбитол, формируя бесцветные колонии.

Функции компонентов:

• Тритон и протеоз-пептон: обеспечивают углеродные, азотистые соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые питательные вещества.
• Кристаллический фиолетовый и желчные соли: подавляют рост большинства грамположительных микроорганизмов.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Добавка Tellurite-Cefixime (FD147): делает среду селективной. Теллурит калия подавляет виды Aeromonas и Providencia; цефиксим ингибирует виды Proteus.
• Pseudomonas, при наличии, образуют бесцветные колонии. Для подтверждения рекомендуется проведение теста на оксидазу (результат оценивается в течение 5–10 секунд).

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 25,06 г порошка в 495 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Добавление селективной добавки

При необходимости в 495 мл стерильной расплавленной и охлажденной среды асептически добавляют одну ампулу селективной добавки TC (FD147) перед розливом в чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические параметры

• Конечный pH (при 25 °C): 7,1 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Внешний вид: светло-желтый или розовый однородный свободнотекучий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,35% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурно-красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель

Общие спецификации

Культуральные характеристики

Инкубация при 35–37 °C в течение 18–24 часов (при необходимости до 48 часов).

Область применения и ограничения

Типы образцов

• Клинические образцы: кал.
• Пищевые образцы.

Ограничения

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli, однако некоторые штаммы могут быть отрицательными.
• Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательного подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрыть во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Комплект поставки и совместимость

• Основа среды: 100 г.
• По заявке поставляется: FD147 Tellurite-Cefixime Supplement / Цефиксим-теллуритная добавка.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Соответствие: ГОСТ Р 54354-2011.
• Меры предосторожности: только для профессионального использования (In Vitro диагностика). При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Контаминированные материалы подлежат стерилизации в автоклаве перед утилизацией.