Основа ХайХром агара МакКонки с сорбитом для энтеротоксигенных E.coli HiMedia M1340-100G (уп/100 гр)

Порошковая диагностическая питательная среда Основа ХайХром агара МакКонки с сорбитом для энтеротоксигенных E.coli HiMedia M1340-100G (уп/100 гр) с конечным pH 7,1 ± 0,2. Применяется для селективного выделения Escherichia coli O157:H7 из пищевых продуктов и материалов, связанных с кормлением животных; для повышения селективности в среду асептически добавляют теллурит-цефексимную добавку FD147.

Назначение

Основа предназначена для приготовления агара МакКонки с сорбитом, применяемого для селективного выделения Escherichia coli O157:H7 из клинических образцов и пищевых продуктов.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Соответствие: ГОСТ Р 54354-2011
• Происхождение: животное
• Тип продукта: HiCrome™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)

По заявке поставляется теллурит-цефексимная добавка FD147 (Tellurite-Cefixime Supplement).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Агар МакКонки с сорбитом основан на рецептуре, описанной Раппапортом и Хенигом. В составе среды сорбит заменяет лактозу. Среда предназначена для выявления энтеропатогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, которые ферментируют лактозу, но не ферментируют сорбит, поэтому образуют бесцветные колонии.

Штаммы Escherichia coli, ферментирующие сорбит, образуют розово-красные колонии. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из сорбита, поглощением нейтрального красного и последующим изменением цвета красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Escherichia coli O157:H7 является причиной геморрагического колита. При использовании агара МакКонки с сорбитом чувствительность выявления Escherichia coli O157:H7 составляет 100 %, специфичность — 85 %; среда может использоваться как средство скрининга Escherichia coli O157:H7.

Индикатор B.C. добавлен для выявления фермента β-D-глюкуронидазы, характерного для Escherichia coli. Штаммы Escherichia coli, ферментирующие сорбит и обладающие активностью β-D-глюкуронидазы, образуют на среде сине-фиолетовые колонии. Энтеропатогенные штаммы Escherichia coli O157:H7 не обладают активностью β-D-глюкуронидазы и не ферментируют сорбит, поэтому формируют бесцветные колонии.

Триптон и протеозопептон обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами для роста. Большинство грамположительных микроорганизмов подавляется кристаллическим фиолетовым и желчными солями. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Добавление теллурит-цефексимной добавки FD147 придаёт среде селективные свойства:

• теллурит калия отбирает серогруппы и подавляет виды Aeromonas и Providencia;
• цефиксим подавляет виды Proteus;
• присутствующие Pseudomonas образуют на среде бесцветные колонии.

Для подтверждения принадлежности подозрительных колоний можно выполнить оксидазный тест. Результат следует регистрировать в течение 5–10 с.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 25,06 г порошка в 495 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите расплавленную среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. При необходимости содержимое одного флакона селективной добавки TC Selective Supplement (FD147), предварительно регидратированное, можно асептически добавить к 495 мл стерильной расплавленной и охлаждённой среды перед разливом в стерильные чашки Петри.

Образцы

• Клинические образцы: кал.
• Пищевые образцы: пищевые продукты.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,35 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,01 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости инкубацию продолжают до 48 ч.