Поддерживающий агар для S.faecalis HiMedia M134-100G (уп/100 гр)

Микробиологическая питательная среда «Поддерживающий агар для S.faecalis HiMedia M134-100G (уп/100 гр)» производства HiMedia — порошковый агар для поддержания тест-культур микроорганизмов. Применяется для поддержания Enterococcus hirae ATCC 8043 и подготовки инокулята для микробиологического анализа фолиевой кислоты; готовая среда требует стерилизации автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин.

Назначение

Среда рекомендована для поддержания Enterococcus hirae ATCC 8043. Folic Acid Culture Agar используют для поддержания маточных культур широкого спектра тест-микроорганизмов, применяемых в микробиологическом анализе витаминов:

• Lactobacillus leichmannii ATCC 7830;
• Enterococcus hirae ATCC 8043;
• Lactobacillus plantarum (casei) ATCC 8014;
• Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469.

Среда сформулирована по Kavanagh и рекомендована AOAC для поддержания Enterococcus hirae ATCC 8043 — тестового организма для среды анализа фолиевой кислоты. По составу эквивалентна пептонизированному молоку.

Состав

Состав на 1 л:

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Дрожжевой экстракт и пептонизированное молоко являются основными источниками азотистых питательных веществ, витаминов и минеральных компонентов, необходимых для роста тестовых организмов. Декстроза служит источником энергии, томатный сок обеспечивает факторы роста. Полисорбат 80 поддерживает поверхностное натяжение среды на оптимальном уровне, а фосфат выполняет буферную функцию.

Важной частью любого анализа является поддержание тестового организма и подготовка инокулята. Среду применяют для поддержания маточных культур микроорганизмов, используемых при микробиологическом анализе витаминов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 48 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Распределите среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Быстро охладите пробирки до 45–50 °C в вертикальном положении.

Методика подготовки инокулята

1. Инокулируйте 10 мл среды для инокулята фолиевой кислоты (M541) культурой возрастом 18–24 ч, выращенной на Folic Acid Culture Agar.
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
3. Центрифугируйте полученную культуру.
4. После удаления надосадочной жидкости ресуспендируйте осадок в 10 мл стерильного физиологического раствора концентрацией 0,85 %.
5. Повторите промывание физиологическим раствором ещё два раза.
6. Разведите 1 мл отмытой суспензии клеток в 99 мл стерильного физиологического раствора концентрацией 0,85 %; коэффициент разведения — 1:100.
7. Отрегулируйте концентрацию инокулята в соответствии с требованиями анализа или нормативной ссылкой.

При проведении анализа необходимо предотвращать загрязнение среды и стеклянной посуды. Используйте чистую стеклянную посуду, не содержащую моющих средств. Даже небольшое количество постороннего загрязнения может привести к ошибочным результатам.

Тип образца

• Изолированный микроорганизм.

Отбор и обращение с образцами

Для образцов изолированных микроорганизмов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках образуется гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, в виде столбика.

Реакция и pH

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,8 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,60–7,00.

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначение *: соответствующие номера WDCM.

Обозначение #: ранее использовавшееся название — Lactobacillus casei.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой упаковке, в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После каждого использования плотно закрывайте упаковку.
• Гигроскопичность продукта может приводить к образованию комков при ненадлежащем хранении.
• Рабочие характеристики среды должны сохраняться при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в течение установленного срока годности и при рекомендуемой температуре хранения.

Предупреждения и меры предосторожности

1. Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
2. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
3. Соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
4. При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
5. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
6. Не допускайте загрязнения среды и стеклянной посуды, используемых для анализа.
7. Используйте чистую стеклянную посуду, не содержащую моющих средств.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо обезвреживать безопасным способом с помощью автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методами.

Сравнительный контекст

В отличие от универсальных питательных агаров, Folic Acid Culture Agar содержит томатный сок, полисорбат 80, фосфатный буфер и компоненты пептонизированного молока, предназначенные для поддержания тестовых культур, используемых в анализе фолиевой кислоты.