Агар для определения чувствительности к противогрибковым средствам HiMedia M1336-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда HiMedia M1336-500G Antimycotic Sensitivity Test Agar (уп/500 гр) для определения чувствительности к противогрибковым средствам диско-диффузионным методом. Агар применяется для исследования изолированных микроорганизмов с использованием дисков с антимикотиками; для получения корректных результатов необходимо использовать свежеприготовленные чашки со средой.

Назначение

HiMedia M1336-500G предназначен для тестирования чувствительности грибов к противогрибковым средствам методом диффузии с использованием дисков для определения чувствительности к антимикотикам. Методика может применяться для оценки зон подавления роста и при тестировании минимальной ингибирующей концентрации.

Тип образца: изолированный микроорганизм.

Метод дисковой диффузии используется как альтернатива методам, основанным на разведении в бульоне. Интерпретация результатов зависит от вида микроорганизма и состава питательной среды; для дрожжей рода Candida применяются установленные интерпретационные критерии диаметра зон задержки роста.

Состав

Формула среды приведена в расчёте на 1 л; состав скорректирован и стандартизирован под заявленные рабочие параметры.

Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2.

Принцип действия

Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы основными питательными веществами, включая аминокислоты, витамины и микроэлементы. Глюкоза служит источником энергии. Двузамещённый фосфат натрия выполняет буферную функцию.

При диско-диффузионном тестировании противогрибковое средство диффундирует из диска в агар и подавляет рост чувствительного микроорганизма, формируя вокруг диска зону задержки роста. Диаметр зоны используют для оценки активности антимикотика.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 85,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Подготовка инокулята

1. Используйте культуру возрастом 24 ч, выращенную на агаре Сабуро с декстрозой M063 при температуре 35 ± 2 °C.
2. Отберите пять отдельных колоний размером приблизительно 1 мм.
3. Суспендируйте колонии в 5 мл стерильного физиологического раствора с концентрацией 0,85 %.
4. Перемешайте полученную суспензию на вихревом смесителе.
5. Отрегулируйте мутность суспензии до содержания 1 × 10⁶–5 × 10⁶ клеток/мл, что соответствует стандарту 0,5 по Мак-Фарланду.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте чашки со средой HiMedia M1336-500G для определения чувствительности к дискам с противогрибковыми средствами. Толщина слоя среды в чашках должна составлять около 4 мм.
2. Погрузите стерильный нетоксичный ватный тампон на деревянном аппликаторе в стандартизированный инокулят. Мутность инокулята должна обеспечивать полусливной рост на чашке Петри.
3. Поверните смоченный тампон, плотно прижимая его к верхней внутренней стенке пробирки, чтобы удалить избыток жидкости.
4. Засейте тампоном всю поверхность агара трижды, поворачивая чашку на 60° между нанесениями.
5. Оставьте инокулят подсыхать на 5–15 мин при закрытой крышке.
6. Асептически нанесите диски с противогрибковыми средствами. Расстояние между центрами дисков должно составлять не менее 24 мм.
7. Переверните чашки и поместите их в инкубатор, установленный на 35 ± 2 °C, не позднее чем через 15 мин после нанесения дисков.
8. Исследуйте каждую чашку после 20–24 ч инкубации.
9. При правильно выполненном посеве зоны задержки роста должны быть равномерно круглыми, а поверхность чашки — покрыта полусливным газоном роста.
10. Считывайте результат через 48 ч только в том случае, если через 24 ч инкубации наблюдался недостаточный рост.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (ПЭВП, HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,40–6,80
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 8,5 % масс./об.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Масса упаковки: 500 г

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет: от кремового до жёлтого.

Состояние: однородный, свободно сыпучий порошок.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 2,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакцию определяют для водного раствора с концентрацией 8,5 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Средний диаметр зоны задержки роста измеряют после инкубации при 25–30 °C в течение 48–72 ч.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 10–30 °C
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости, в сухом проветриваемом помещении
• Защита при хранении: не допускать воздействия экстремальных температур и источников воспламенения
• Состояние среды перед использованием: использовать свежеприготовленные чашки
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом месте. Продукт гигроскопичен; при попадании влаги возможно образование комков. После каждого использования ёмкость следует герметично закрывать. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ограничения применения

Свежеприготовленные чашки со средой необходимо использовать непосредственно для анализа. Применение несвежих чашек