Агар для определения чувствительности к противогрибковым средствам HiMedia M1336-500G (уп/500 гр)

Диагностический агар для определения чувствительности к противогрибковым средствам HiMedia M1336-500G производства HiMedia. Рекомендуется для тестирования антимикотиков диско-диффузионным методом с использованием специализированных чувствительных дисков.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для оценки противогрибковой активности методом диффузии дисков (определение чувствительности или минимальной подавляющей концентрации — МПК). Состав среды включает триптон и дрожжевой экстракт, которые обеспечивают необходимые питательные вещества (аминокислоты, витамины, микроэлементы), глюкозу в качестве источника энергии и гидрофосфат натрия для стабилизации pH.

Методика опирается на стандарты CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute), в частности документ M44-A. Установлено, что метод диффузии в агаре хорошо коррелирует с результатами определения МПК для таких препаратов, как флуконазол и 5-фторцитозин (5-FC).

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 6,6 ± 0,2.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Для приготовления инокулята берут пять отдельных колоний размером примерно 1 мм из 24-часовой культуры, выращенной на агаре Сабуро с декстрозой (M063) при температуре 35 ± 2 °C.
2. Колонии суспендируют в 5 мл стерильного 0,85 % раствора NaCl.
3. Суспензию перемешивают на вортексе и доводят мутность до значения 1 × 10⁶ – 5 × 10⁶ клеток/мл (соответствует стандарту МакФарланда 0,5).

Процедура тестирования

1. Подготовьте чашки с агаром M1336. Среда должна быть стерильной, толщина слоя — около 4 мм.
2. Стерильным нетоксичным ватным тампоном на деревянном аппликаторе нанесите стандартизированный инокулят на поверхность агара. Излишки жидкости удаляют, плотно прижав тампон к верхней внутренней стенке пробирки.
3. Поверхность агара в чашке обсевают тампоном трижды, поворачивая чашку на 60° после каждого прохода. Оставьте инокулят подсохнуть в течение 5–15 минут с закрытой крышкой.
4. Асептически наложите диски с антимикотиками так, чтобы расстояние между центрами дисков составляло не менее 24 мм.
5. В течение 15 минут после наложения дисков переверните чашки и поместите в инкубатор при температуре 35 ± 2 °C.
6. Оцените результат через 20–24 часа инкубации. При правильном посеве наблюдается полусплошной рост микроорганизмов и равномерные круговые зоны задержки роста. Если рост недостаточен, чтение результатов проводится через 48 часов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 85,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Культуральные характеристики

Средний диаметр зоны задержки роста после инкубации при 25–30 °C в течение 48–72 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Использовать только свежеприготовленные среды, чтобы избежать ошибочных результатов.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация отработанных сред и материалов, контактировавших с образцами, должна осуществляться путем автоклавирования или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.