Основа бульона Фрейзера HiMedia M1327-500G (уп/500 гр)

HiMedia·Арт.: 0008467·Арт. произв.: M1327-500G

Основа бульона Фрейзера HiMedia M1327-500G (уп/500 гр)

Name: Основа бульона Фрейзера HiMedia M1327-500G (уп/500 гр)
Brand: HiMedia
SKU: 0008467
Price: 13967 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ13 967 руб.

Основа бульона Фрейзера HiMedia M1327-500G (уп/500 гр) — сухая питательная среда производства HiMedia для первичного и вторичного обогащения проб с целью выделения и подсчета Listeria monocytogenes. Применяется для анализа пищевых продуктов и кормов для животных; состав и критерии эффективности соответствуют стандартам ISO 11290-1:2017, ISO 11290-2:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd.: 2020.

Описание

Принцип измерения

Среда разработана для создания оптимальных условий роста видов Listeria. Все представители рода Listeria обладают бета-глюкозидазной активностью, что проявляется в почернении среды. Бактерии гидролизуют эскулин (замещенный глюкозид) до глюкозы и эскулетина; последний взаимодействует с ионами железа из цитрата аммония-железа (добавка FD141), образуя черно-коричневый комплекс 6,7-дигидроксикумарина.

Для подавления сопутствующей микрофлоры используются следующие механизмы:

Высокая концентрация NaCl и хлорид лития ингибируют рост энтерококков, также способных гидролизовать эскулин.
Налидиксовая кислота и акрифлавина гидрохлорид (добавка FD125I) подавляют рост большинства сопровождающих бактерий.
Фосфаты поддерживают буферную емкость среды.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

Растворить 54,92 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагреть до полного растворения.
Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
Охладить до 45–50 °C.
Асептически добавить добавки:
- Для первичного обогащения (на 1000 мл): 1 флакон селективной добавки Фрейзера (FD125I) и 2 флакона добавки Фрейзера (FD141).
- Для вторичного обогащения (на 500 мл): 1 флакон FD125I и 1 флакон FD141.
Тщательно перемешать и разлить по пробиркам или колбам.

Процедура анализа

Первичная суспензия: Среда используется как разбавляющий раствор. Соотношение: 25 г (или 25 мл) образца на 225 мл среды (M1327 + 1 флакон FD125I + 2 флакона FD141).
Первичное обогащение: Инкубировать при 30 ± 1 °C в течение 24–26 часов. Допускается хранение преобогащенного образца при 5 °C не более 72 часов перед переносом во вторичный бульон. В процессе инкубации может развиться черное окрашивание.
Вторичное обогащение: Перенести 0,1 мл культуры из первичного обогащения в 10 мл бульона Фрейзера. Инкубировать при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов. Для восстановления видов Listeria, отличных от L. monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация в течение 24 часов.
Посев: Образцы после обогащения высевают на агар Оттавиани-Агости HiCrome™ Listeria (M1540I), оксфордскую среду для листерий (M1145) или идентификационный агар для листерий (PALCAM) (M1064I). Инкубировать при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов (дополнительные 24 часа для других видов Listeria spp.).

Технические характеристики

Состав (ISO 11290 Specification - Half Fraser & Fraser)

Компонент	г/л
Энзимный дигест тканей животных	5,000
Энзимный дигест казеина	5,000
Экстракт дрожжей	5,000
Мясной экстракт	5,000
Натрия хлорид	20,000
Натрия гидрофосфат двухводный	12,000
Калия дигидрофосфат	1,350
Эскулин	1,000
Лития хлорид	3,000
Конечный pH (при 25 °C)	7,2 ± 0,2

Добавки (вносятся после автоклавирования)

Компонент	Half Fraser (г/л)	Fraser (г/л)	Добавка	Half Fraser (кол-во)	Fraser (кол-во)
Акрифлавина гидрохлорид	0,0125	0,025	FD125I	1 флакон	2 флакона
Налидиксовая кислота, натриевая соль	0,01	0,02
Цитрат аммония-железа	0,5	0,50	FD141	2 флакона	2 флакона

Общие параметры

Происхождение: животное
Тип продукта: стандартный
Физическая форма: порошок
Материал упаковки: ПЭВП (HDPE)
Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
Цвет и прозрачность готовой среды: базовый раствор — желтый прозрачный с небольшим осадком; после добавления supplements — флуоресцентно-желтый прозрачный с небольшим осадком
pH (5,49% водный раствор при 25 °C): 7,00–7,40 (номинал 7,2 ± 0,2)

Культуральные характеристики

Half Fraser (Первичное обогащение)

Инкубация при 30 ± 1 °C в течение 25 ± 1 ч. Последующий посев на M1540I при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.

Продуктивность

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Гидролиз эскулина	Восстановление на M1540I	Цвет колоний на M1540I
Listeria monocytogenes 1/2a ATCC 35152	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$
Listeria monocytogenes 1/2a ATCC 35152	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$
Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$
Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$

Селективность (восстановление на Tryptone Soya Agar M290 при 37 ± 1 °C, 48 ± 4 ч)

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление на M290
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	ингибирован	0
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	ингибирован	0
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	отсутствует-слабый	<100 колоний
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	отсутствует-слабый	<100 колоний

Fraser (Вторичное обогащение)

Инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Последующий посев на M1540I при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.