Основа бульона Фрейзера HiMedia M1327-500G (уп/500 гр)
Основа питательной среды HiMedia M1327-500G (уп/500 гр) — порошковая основа бульона Фрейзера производства HiMedia для микробиологического анализа пищевых продуктов и кормов. Применяется для первичного и вторичного обогащения при выделении и подсчёте Listeria monocytogenes, масса упаковки — 500 г.
Описание
Основа питательной среды HiMedia M1327-500G (уп/500 гр) — порошковая основа бульона Фрейзера производства HiMedia для микробиологического анализа пищевых продуктов и кормов. Применяется для первичного и вторичного обогащения при выделении и подсчёте Listeria monocytogenes, масса упаковки — 500 г.
Назначение
Основа бульона Фрейзера HiMedia M1327-500G предназначена для приготовления среды первичного и вторичного обогащения при выделении и количественном определении Listeria monocytogenes из образцов пищевых продуктов и кормов для животных.
Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 11290-1:2017, ISO 11290-2:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd.: 2020. Среда основана на рецептуре Fraser и Sperber и предназначена для создания условий, оптимальных для роста видов рода Listeria.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Артикул: M1327-500G
- Наименование: основа бульона Фрейзера
- Назначение изделия: основа питательной среды
- Форма выпуска: порошок
- Тип продукта: стандартный
- Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
- Масса упаковки: 500 г
- Сертификат: ФСЗ 2009/03706
- Происхождение компонентов: животное
Состав среды
Спецификация ISO 11290 — полу-бульон Фрейзера и бульон Фрейзера
Состав приведён в расчёте на 1 л среды.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Ферментативный перевар тканей животного происхождения | 5,000 |
| Ферментативный перевар казеина | 5,000 |
| Дрожжевой экстракт | 5,000 |
| Мясной экстракт | 5,000 |
| Хлорид натрия | 20,000 |
| Гидрофосфат натрия дигидрат | 12,000 |
| Дигидрофосфат калия | 1,350 |
| Эскулин | 1,000 |
| Хлорид лития | 3,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 7,2 ± 0,2 |
Бульон Фрейзера: полу-бульон Фрейзера и бульон Фрейзера
Состав приведён в расчёте на 1 л среды.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Пептон # | 5,000 |
| Триптон $ | 5,000 |
| Дрожжевой экстракт | 5,000 |
| Экстракт HM ## | 5,000 |
| Хлорид натрия | 20,000 |
| Гидрофосфат натрия дигидрат | 12,000 |
| Дигидрофосфат калия | 1,350 |
| Эскулин | 1,000 |
| Хлорид лития | 3,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 7,2 ± 0,2 |
Добавки после автоклавирования
| Полу-бульон Фрейзера, г/л | Бульон Фрейзера, г/л | Полу-бульон Фрейзера, г/л | Бульон Фрейзера, г/л | ||
|---|---|---|---|---|---|
| FD125I | 1 флакон | 2 флакона | |||
| Гидрохлорид акрифлавина | 0,0125 | 0,025 | Гидрохлорид акрифлавина | 0,0125 | 0,025 |
| Налидиксовая кислота, натриевая соль | 0,01 | 0,02 | Налидиксовая кислота, натриевая соль | 0,01 | 0,02 |
| FD141 | 2 флакона | 2 флакона | |||
| Цитрат аммония и железа | 0,5 | 0,50 | Цитрат аммония и железа | 0,5 | 0,50 |
Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.
#Эквивалент ферментативного переваривания тканей животного происхождения.$Эквивалент ферментативного переваривания казеина.##Эквивалент мясного экстракта.
Принцип действия и интерпретация
Виды рода Listeria широко распространены в окружающей среде. Бактерии выделяют из почвы, разлагающихся растительных материалов, силоса, сточных вод, воды, кормов для животных, свежего и замороженного мяса птицы, мяса, сырого молока, сыра, а также от бессимптомных носителей среди людей и животных.
L. monocytogenes преимущественно вызывает у человека менингит, энцефалит или септицемию. У беременных женщин инфекция, вызванная L. monocytogenes, часто протекает как гриппоподобное бактериемическое заболевание, которое при отсутствии лечения может привести к амниониту и инфицированию плода, вызывая аборт, мертворождение или преждевременные роды. Основным путём передачи являются контаминированные пищевые продукты.
Пептон, триптон, дрожжевой экстракт и экстракт HM повышают питательность среды, обеспечивая микроорганизмы необходимыми углеродсодержащими и азотсодержащими веществами. Фосфаты поддерживают буферную ёмкость среды.
Все виды рода Listeria обладают β-глюкозидазной активностью, проявляющейся почернением среды. Виды Listeria гидролизуют эскулин — замещённый гликозид — до глюкозы и эскулетина. Эскулетин взаимодействует с ионами железа из цитрата аммония и железа, входящего в добавку FD141, с образованием чёрно-коричневого комплекса 6,7-дигидроксикумарина.
Цитрат аммония и железа также способствует росту L. monocytogenes. Высокая устойчивость Listeria к хлориду натрия используется для подавления роста энтерококков. Хлорид лития также подавляет энтерококки, которые способны гидролизовать эскулин. Рост сопутствующих бактерий в значительной степени подавляется добавлением налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина, входящих в FD125I.
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 54,92 г сухой среды — эквивалентную массу обезвоженной среды на 1 л — в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
- При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
- Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- Для приготовления среды первичного обогащения асептически добавьте в 1000 мл среды регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки Фрейзера FD125I и 2 флаконов добавки Фрейзера FD141.
- Для приготовления среды вторичного обогащения асептически добавьте в 500 мл среды регидратированное содержимое 1 флакона FD125I и 1 флакона FD141.
- Тщательно перемешайте.
- Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
Методика анализа
Тип образца
Пищевые продукты.
Отбор и подготовка образцов
Первичная суспензия
Бульон используют в качестве жидкости для разведения при приготовлении первичной суспензии.
- Образец: 25 г или 25 мл.
- Объём среды: 225 мл.
- Состав среды: M1327 с добавлением 1 флакона FD125I и 2 флаконов FD141.
Первичное обогащение
- Приготовленное в полу-бульоне Фрейзера разведение инкубируйте при 30 °C ± 1 °C в течение 24–26 ч.
- После инкубации предварительно обогащённый образец можно хранить при 5 °C не более 72 ч до переноса в бульон Фрейзера для вторичного обогащения.
- Во время инкубации может развиваться чёрное окрашивание.
Вторичное обогащение
- Перенесите 0,1 мл культуры из среды первичного обогащения в 10 мл бульона Фрейзера для вторичного обогащения.
- Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
- Для восстановления большего количества видов Listeria, отличных от L. monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация в течение 24 ч.
После первичного и вторичного обогащения выполните пересев образцов на следующие селективные среды:
- основу агара HiCrome™ для Listeria по методу Ottaviani–Agosti — M1540I;
- основу среды Оксфорд для Listeria — M1145;
- основу агара для идентификации Listeria PALCAM — M1064I.
Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Для восстановления большего количества видов Listeria, отличных от L. monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
Контроль качества
Внешний вид
Однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до жёлтого цвета.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
- Основная среда: прозрачный раствор жёлтого цвета с небольшим количеством осадка.
- После добавления добавок: в пробирках образуется прозрачный раствор флуоресцентно-жёлтого цвета с небольшим количеством осадка.
Реакция
- Условия определения: водный раствор с концентрацией 5,49 % масс./об. при 25 °C.
- pH: 7,2 ± 0,2.
Диапазон pH
7,00–7,40.
Культуральные характеристики
Полу-бульон Фрейзера
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Сертификат
| Сертификат | ФСЗ 2009/03706 |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
