HiMedia M1327-100G Основа бульона Фрейзера

HiMedia·Арт.: 0049178·Арт. произв.: M1327-100G

HiMedia M1327-100G Основа бульона Фрейзера

Name: HiMedia M1327-100G Основа бульона Фрейзера
Brand: HiMedia
SKU: 0049178
Price: 4890 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ4 890 руб.

Сухая основа питательной среды HiMedia M1327-100G Основа бульона Фрейзера для изоляции и количественного учёта Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах. Среда соответствует спецификациям стандартов ISO 11290-1:2017, ISO 11290-2:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd.: 2020.

Описание

Принцип измерения

Среда разработана для обеспечения оптимальных условий роста видов Listeria. Питательные компоненты (пептон, триптон, дрожжевой экстракт и мясной экстракт) обеспечивают высокую питательную ценность, поставляя необходимые углеродные и азотистые вещества. Фосфаты поддерживают буферную емкость среды.

Все виды Listeria обладают бета-глюкозидазной активностью, что проявляется почернением среды. Бактерии гидролизируют эскулин (замещенный глюкозид) до глюкозы и эскулетина. Последний взаимодействует с ионами железа из цитрата аммония-железа (добавка FD141), образуя черно-коричневый комплекс 6,7-дигидроксикумарина. Цитрат аммония-железа также стимулирует рост L. monocytogenes.

Высокая солеустойчивость Listeria (благодаря хлориду натрия) и добавление хлорида лития подавляют рост энтерококков, которые также способны гидролизовать эскулин. Рост сопутствующей микрофлоры подавляется за счет добавления налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина (добавка FD125I).

Методика проведения анализа

Подготовка среды

Растворить 54,92 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
При необходимости нагреть до полного растворения.
Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
Охладить до 45–50 °C.
Асептически добавить селективные добавки:
- Для первичного обогащения (на 1000 мл): 1 флакон Fraser Selective Supplement (FD125I) и 2 флакона Fraser Supplement (FD141).
- Для вторичного обогащения (на 500 мл): по 1 флакону каждой добавки.
Тщательно перемешать и разлить по пробиркам или колбам.

Процедура анализа

Первичное обогащение:
- Подготовить начальную суспензию: 25 г (или 25 мл) образца добавить к 225 мл среды (M1327 + 1 флакон FD125I + 2 флакона FD141).
- Инкубировать при 30 ± 1 °C в течение 24–26 часов. В ходе инкубации может развиться черное окрашивание.
- Преобогащенный образец можно хранить при 5 °C не более 72 часов перед переносом во вторичную среду.
Вторичное обогащение:
- Перенести 0,1 мл культуры из первичного обогащения в 10 мл бульона Фрейзера.
- Инкубировать при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов.
- Для видов Listeria, отличных от L. monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация в течение 24 часов.
Посев на твердые среды:
- Образцы после обогащения пересевают на агар HiCrome™ Listeria Ottaviani-Agosti (M1540I), среду Listeria Oxford (M1145) или идентификационный агар Listeria (PALCAM) (M1064I).
- Инкубировать при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов (дополнительные 24 часа для других видов Listeria spp.).

Технические характеристики

Состав (ISO 11290 Specification - Half Fraser & Fraser)

Компонент	г/л
Энзимный гидролизат тканей животных	5,000
Энзимный гидролизат казеина	5,000
Дрожжевой экстракт	5,000
Мясной экстракт	5,000
Хлорид натрия	20,000
Гидрофосфат натрия двуводный	12,000
Дигидрофосфат калия	1,350
Эскулин	1,000
Хлорид лития	3,000
Конечный pH (при 25 °C)	7,2 ± 0,2

Добавки (вводятся после автоклавирования)

Компонент	Half Fraser (г/л)	Fraser (г/л)	Добавка	Half Fraser (кол-во)	Fraser (кол-во)
Гидрохлорид акрифлавина	0,0125	0,025	FD125I	1 флакон	2 флакона
Налидиксовая кислота, натриевая соль	0,01	0,02	Гидрохлорид акрифлавина	0,0125	0,025
			Налидиксовая кислота, натриевая соль	0,01	0,02
Цитрат аммония-железа	0,5	0,50	FD141	2 флакона	2 флакона
			Цитрат аммония-железа	0,5	0,50

Общие параметры

Параметр	Значение
Происхождение	Животное
Тип продукта	Стандартный
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)
Вес: 100 г
Внешний вид: порошок от кремового до желтого цвета, однородный, свободно текучий
Цвет и прозрачность готовой среды: базальный раствор желтый, прозрачный с небольшим осадком; после добавления селективных компонентов — флуоресцентно-желтый, прозрачный с небольшим осадком
pH (5,49% р-р при 25 °C): 7,2 ± 0,2
Диапазон pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Half Fraser (Первичное обогащение)

Характеристики наблюдаются после добавления FD125I и FD141, инкубации при 30 ± 1 °C в течение 25 ± 1 ч. Последующий посев на M1540I при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.

Продуктивность

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Гидролиз эскулина	Выход на M1540I	Цвет колоний на M1540I
Listeria monocytogenes 1/2a ATCC 35152	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$
Listeria monocytogenes 1/2a ATCC 35152	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$
Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$
Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$

Селективность Инкубация при 30 ± 1 °C в течение 25 ± 1 ч, последующий посев на соево-казеиновый агар (M290) при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Выход на M290
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	подавлен	0
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	подавлен	0
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	отсутствует-слабый	<100 колоний
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	отсутствует-слабый	<100 колоний

Fraser (Вторичное обогащение)

Характеристики наблюдаются после добавления FD125I и FD141, инкубации при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Последующий посев на M1540I при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.