HiMedia M1327-100G Основа бульона Фрейзера

Основа питательной среды HiMedia M1327-100G Основа бульона Фрейзера — порошковая среда для первичного и вторичного обогащения при выделении Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и кормов для животных. Среда предназначена для изоляции и количественного определения Listeria spp. с последующим высевом на селективные питательные среды.

Назначение и область применения

Основа бульона Фрейзера применяется для первичного и вторичного обогащения при выделении и количественном определении Listeria monocytogenes из образцов пищевых продуктов и кормов для животных.

Состав и показатели эффективности среды соответствуют требованиям ISO 11290-1:2017, ISO 11290-2:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd.: 2020.

Тип образца: пищевые продукты.

Состав

Полу-Фрейзер и бульон Фрейзера по ISO 11290

Состав полу-Фрейзера и бульона Фрейзера, г/л:

Бульон Фрейзера: полу-Фрейзер и бульон Фрейзера

Добавки после автоклавирования

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

• # Эквивалент ферментативного перевара тканей животного происхождения.
• $ Эквивалент ферментативного перевара казеина.
• ## Эквивалент мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация

Виды Listeria широко распространены в окружающей среде. Они выделяются из почвы, разлагающихся растительных материалов, силоса, сточных вод, воды, кормов для животных, свежего и замороженного мяса птицы, мяса, сырого молока, сыра, а также от бессимптомных носителей среди людей и животных.

Listeria monocytogenes преимущественно вызывает у человека менингит, энцефалит или септицемию. У беременных женщин Listeria monocytogenes часто вызывает гриппоподобное бактериемическое заболевание, которое при отсутствии лечения может привести к амниониту и инфицированию плода, вызывая аборт, мертворождение или преждевременные роды. Основным путём передачи являются загрязнённые пищевые продукты.

Основа бульона Фрейзера разработана на основе состава Фрейзера и Спербера и используется для выявления видов Listeria в пищевых продуктах. Среда обеспечивает условия для роста Listeria и рекомендована ISO для первичного и вторичного обогащения видов Listeria.

Пептон, триптон, дрожжевой экстракт и экстракт HM повышают питательность среды за счёт обеспечения необходимыми углеродсодержащими и азотсодержащими веществами. Фосфаты поддерживают буферную ёмкость среды.

Все виды Listeria обладают β-глюкозидазной активностью, которая проявляется почернением среды. Виды Listeria гидролизуют эскулин — замещённый глюкозид — до глюкозы и эскулетина. Эскулетин соединяется с ионами железа из цитрата аммония и железа (FD141), в результате чего образуется чёрно-коричневый комплекс 6,7-дигидроксикумарина. Цитрат аммония и железа также усиливает рост Listeria monocytogenes.

Высокая солеустойчивость Listeria к хлориду натрия используется для подавления роста энтерококков. Хлорид лития также подавляет энтерококки, которые способны гидролизовать эскулин. Рост сопутствующих бактерий в значительной степени подавляется добавлением налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина (FD125I).

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию 54,92 г сухой среды — эквивалентная масса обезвоженной среды на 1 л — в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Для первичного обогащения асептически добавьте в 1000 мл среды восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки Фрейзера FD125I и 2 флаконов добавки Фрейзера FD141.
6. Для вторичного обогащения асептически добавьте по 1 флакону FD125I и FD141 в 500 мл среды.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.

Пробоподготовка и проведение анализа

Первичная суспензия

Бульон используется как разбавляющая жидкость для приготовления исходной суспензии.

Соотношение компонентов: 25 г образца или 25 мл образца на 225 мл среды M1327 с добавлением 1 флакона FD125I и 2 флаконов FD141.

Первичное обогащение

1. Инкубируйте приготовленное в полу-Фрейзерном бульоне разведение при температуре 30 °C ± 1 °C в течение 24–26 ч.
2. После инкубации предварительно обогащённый образец можно хранить при 5 °C не более 72 ч до переноса в бульон Фрейзера для вторичного обогащения.
3. В процессе инкубации может развиться чёрное окрашивание.

Вторичное обогащение

1. Перенесите 0,1 мл культуры из среды первичного обогащения в 10 мл бульона Фрейзера для вторичного обогащения.
2. Инкубируйте при температуре 37 °C ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
3. Для видов Listeria, отличных от Listeria monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация в течение 24 ч, чтобы обеспечить восстановление и выделение большего числа видов.

После первичного и вторичного обогащения выполните пересев на основу агара HiCrome™ «Листерия» Оттавиани—Агости (M1540I), основу среды Оксфорд для Listeria (M1145) или основу агара для идентификации Listeria (PALCAM) (M1064I).

Инкубируйте посевы при температуре 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Для восстановления большего числа видов Listeria, отличных от Listeria monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia