HiMedia M132-100G Агар для тестирования микро-витаминов

Сухая питательная среда HiMedia M132-100G Агар для тестирования микро-витаминов, предназначенная для культивирования и поддержания стоковых культур Lactobacilli. Применяется в микробиологическом анализе витаминов для подготовки инокулята и рутинного выращивания тест-организмов; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип работы и область применения

Агар для тестирования микро-витаминов используется для содержания стоковых культур лактобацилл (Lactobacillus) и других тест-организмов, применяемых в микробиологических анализах витаминов. Среда также подходит для рутинного культивирования и подготовки инокулята.

Лактобациллы представляют собой род грамположительных факультативно-анаэробных молочнокислых бактерий, которые превращают лактозу и другие сахара в молочную кислоту. Образование молочной кислоты закисляет среду, что подавляет рост некоторых патогенных бактерий.

Роль компонентов среды:

• Пептон и дрожжевой экстракт: источники азота, серы, витаминов и других необходимых питательных веществ.
• Декстроза (глюкоза): основной источник энергии.
• Полисорбат 80 (Tween 80): источник жирных кислот.
• Дигидрофосфат калия: буферный агент для стабилизации pH.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 52,1 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Распределите по емкостям и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Работа со стоковыми культурами

Стоковые культуры готовятся путем колющего посева (stab inoculation) в трехкратной повторности. Одна пробирка используется для поддержания стока, остальные — для подготовки инокулята. Пересев культур следует проводить с интервалом в одну или две недели.

Подготовка инокулята для анализа

1. Поместите 16–24 часовую культуру Lactobacilli с агара M132 в бульон для инокулята Micro Vitamin Test Inoculum Broth.
2. После инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов центрифугируйте культуру и слейте супернатант.
3. Ресуспендируйте осадок клеток в 10 мл стерильного физиологического раствора.
4. Повторите промывку еще дважды.
5. Разбавьте промытую суспензию клеток базовой средой для анализа до достижения требуемой плотности клеток.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках формирует столбик).
• Реакция: pH 6,7 ± 0,2 для 5,2% водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,50–6,90.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом месте, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Безопасность: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Ограничения: перенос культур должен осуществляться еженедельно или раз в две недели.
• Утилизация: все контаминированные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.