HiMedia M1301-100G Основа кровяного агара с овечьей кровью

Порошковая питательная среда HiMedia M1301-100G «Основа кровяного агара с овечьей кровью» с конечным pH 7,3 ± 0,2. Предназначена для культивирования микроорганизмов и оценки гемолитических реакций после добавления 7 % стерильной овечьей крови.

Назначение

Основа кровяного агара HiMedia M1301-100G применяется с добавлением овечьей крови для улучшения выявления гемолитических реакций микроорганизмов. Материал предназначен для диагностики in vitro и профессионального использования.

Состав

Для приготовления 1 л питательной среды:

Формула скорректирована и стандартизирована с учётом параметров рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Гемолизины — экзотоксины, вырабатываемые бактериями и вызывающие лизис эритроцитов. Гемолитическую реакцию визуализируют на чашках с кровяным агаром.

• При β-гемолизе вокруг колоний гемолитических бактерий образуется прозрачная бесцветная зона: эритроциты лизируются, а гемоглобин разрушается до бесцветного соединения.
• При α-гемолизе некоторые бактерии восстанавливают гемоглобин до метгемоглобина, вследствие чего вокруг колоний появляется зеленоватая зона.
• При γ-гемолизе гемолиз отсутствует, видимых изменений питательной среды не наблюдается.

Основа кровяного агара № 2 (M834) с добавлением овечьей крови используется для изучения характера гемолитических реакций микроорганизмов. Однако физиологические различия между овечьей и лошадиной кровью могут приводить к смешанным α- и β-гемолитическим реакциям.

Основа кровяного агара с овечьей кровью разработана для максимального восстановления микроорганизмов без влияния на характер их гемолитических реакций. Состав основы совместим с овечьей кровью и обеспечивает более выраженное выявление гемолиза.

Триптон, пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота, углерода, аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. По сравнению с другими основами кровяного агара с добавленной кровью основа кровяного агара с овечьей кровью обеспечивает ожидаемую β-гемолитическую реакцию S.pyogenes.

Методика приготовления среды

1. Суспендировать 40,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладить среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить 7 % стерильной овечьей крови.
6. Тщательно перемешать.
7. Разлить среду в стерильные чашки Петри.

Тип образца

• Клинический материал: патологический материал.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами необходимо применять соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера прочитать маркировку.
• При работе с образцами и культурами использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,25 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Основная среда образует прозрачный гель светло-жёлтого цвета без осадка. После добавления 7 % овечьей крови в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,05 % мас./об. при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с добавлением 7 % об./об. стерильной овечьей крови.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: основа кровяного агара
• Масса: 100 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Добавляемый компонент: 7 % стерильной овечьей крови
• Рекомендуемая навеска: 40,5 г/л

Сравнительное техническое отличие

В отличие от основы кровяного агара № 2 (M834), применение основы с овечьей кровью направлено на снижение влияния физиологических различий между видами крови и получение более выраженных гемолитических реакций микроорганизмов.