ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295I-500G (уп/500 гр)

Питательная селективная агаровая среда ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295I-500G (уп/500 гр) предназначена для определения и подсчёта Escherichia coli в пищевых продуктах. Среда обеспечивает обнаружение E. coli без дополнительного подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реагента.

Назначение

ХайХром агар применяют для обнаружения и количественного определения Escherichia coli в пищевых образцах. Тип питательной среды: диагностическая. Назначение изделия: агар.

Состав и рабочие характеристики среды соответствуют требованиям ISO 16649-1:2018 и ISO 11133:2014 (E) с поправкой Amd.:2020, применяемым к методам микробиологического контроля пищевых продуктов и испытаниям питательных сред.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на триптон-жёлчном агаре и предназначена для ускоренного обнаружения Escherichia coli в пищевых продуктах.

Большинство штаммов E. coli можно отличить от других колиформных бактерий по наличию фермента β-глюкуронидазы, характерного для E. coli. Хромогенный компонент X-глюкуронид используется для выявления активности β-глюкуронидазы:

1. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид.
2. Внутриклеточный фермент β-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом.
3. Освобождённый хромофор окрашивает колонии E. coli в голубовато-зелёный цвет.

Триптон обеспечивает микроорганизмы источниками углерода и азотистых соединений, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Смесь жёлчных солей подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Состав

Состав по спецификации ISO: TBX

Количество компонентов указано в г/л.

Состав HiCrome® E. coli Agar M12951

Количество компонентов указано в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,57 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Поверхность разлитой среды перед использованием необходимо высушить.

Методика подготовки и анализа образцов

Тип образца

Пищевые образцы.

Подготовка пробы

1. Отберите и обработайте пищевой образец в соответствии с применяемыми методиками отбора и подготовки проб.
2. Разведите образец в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной 0,1%-ной по массе/объёму пептонной водой M028.
3. Гомогенизируйте образец с помощью лабораторного блендера или гомогенизатора типа «стомачер».
4. Перенесите пипеткой 0,5 или 1,0 мл гомогенизированного пищевого образца на поверхность агара.
5. Распределите образец по поверхности стерильным стеклянным шпателем.
6. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч.
7. Затем продолжите инкубацию при 44 °C в течение 18 ч.

Условия культивирования и культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч. Степень восстановления принимают за 100 % для роста бактерий на референсной среде — соево-казеиновом агаре (триптон-соевом агаре).

Специфичность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч.

Селективность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Порошок от кремового до жёлтого цвета, однородный, сыпучий.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакцию определяют для 3,66%-ного по массе/объёму водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Значение pH

pH: 7,00–7,40.

Ограничения применения

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут быть β-глюкуронидазоотрицательными.
2. Некоторые виды Salmonella являются β-глюкуронидазоположительными.
3. Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к росту и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на среде.