ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295I-100G (уп/500 гр)

Селективный агар ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295I-100G (уп/500 гр) для выявления и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах по хромогенному методу. Питательная среда применяется без дополнительного подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реактива; фасовка — 500 г.

Назначение

ХайХром агар предназначен для обнаружения и подсчета Escherichia coli в пищевых продуктах без дальнейшего подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реактива.

Состав и характеристики среды соответствуют требованиям ISO 16649-1:2018 и ISO 11133:2014 (E) / Amd.:2020, указанным производителем для данной методики. Среда относится к диагностическим питательным средам; назначение изделия — агар.

Принцип измерения и интерпретация

HiCrome® E. coli Agar основан на триптон-желчном агаре и предназначен для выявления Escherichia coli в пищевых продуктах. Большинство штаммов E. coli можно дифференцировать от других колиформных микроорганизмов по наличию фермента β-глюкуронидазы, высокоспецифичного для E. coli.

Хромогенный агент X-глюкуронид, входящий в состав среды, используется для выявления активности β-глюкуронидазы E. coli. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид, после чего внутриклеточный фермент β-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвободившийся хромофор окрашивает колонии E. coli в голубовато-зелёный цвет.

Триптон обеспечивает микроорганизмы углеродом, азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Смесь желчных солей подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Формуляция соответствует ISO 16649-1, а рабочие характеристики среды — требованиям ISO 11133.

Состав среды

Состав по спецификации ISO: TBX

Состав HiCrome® E. coli Agar M12951

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,57 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,10 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика подготовки и анализа проб

Перед использованием поверхность разлитой среды высушивают.

1. Для пищевых образцов приготовьте разведение 1:5 или 1:10 в 0,1 % (масс./об.) стерильной пептонной воде M028.
2. Гомогенизируйте образец в блендере или лабораторном гомогенизаторе типа «стомахер».
3. Перенесите пипеткой 0,5 или 1,0 мл гомогенизированной пищевой пробы на поверхность чашки.
4. Распределите пробу стерильным стеклянным шпателем.
5. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч.
6. Продолжите инкубацию при 44 °C в течение 18 ч.
7. Интерпретируйте рост по наличию и окраске колоний; колонии E. coli обычно имеют голубовато-зелёную окраску.

Тип образца

• Образцы пищевых продуктов.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 3,66%-ного водного раствора (масс./об.) при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч. Степень восстановления принимают за 100 % при росте бактерий на референсной среде — агаре с переваром соево-казеинового субстрата (триптиказо-соевый агар).

Культуральные характеристики для специфичности оценивают после инкубации при 44 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч.

Культуральные характеристики для селективности оценивают после инкубации при 44 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут давать отрицательную реакцию.
2. Некоторые виды Salmonella являются β-глюкуронидазоположительными.
3. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать вариабельные картины роста на данной среде.
4. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется валидировать среду с учётом требований пользователя.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения комкования из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость следует плотно закрывать.
• Для сохранения рабочих характеристик рекомендуется использовать продукт в пределах установленного срока годности.

Требования безопасности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей практики микробиологической лаборатории при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных