ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295-500G (уп/500 гр)» — селективный агар для обнаружения и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах. Среда применяется для выделения и культивирования Escherichia coli из пищевых продуктов, воды и клинических образцов без дополнительного подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реагента.

Назначение

ХайХром агар HiMedia M1295-500G предназначен для обнаружения и подсчёта Escherichia coli в пищевых продуктах без дальнейшего подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реагента. Среда также применяется для выделения и культивирования Escherichia coli из клинических образцов.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Тип продукта: HiCrome™
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована под заданные параметры эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия

ХайХром агар для Escherichia coli основан на триптон-желчном агаре и предназначен для обнаружения Escherichia coli в пищевых продуктах. Большинство штаммов Escherichia coli можно дифференцировать от других колиформных микроорганизмов по наличию фермента β-глюкуронидазы, характерного для Escherichia coli.

Хромогенный компонент X-глюкуронид используется для выявления активности β-глюкуронидазы Escherichia coli. Клетки Escherichia coli поглощают X-глюкуронид, после чего внутриклеточный фермент β-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвободившийся хромофор придаёт колониям Escherichia coli голубовато-зелёную окраску.

• Триптон и специальный пептон обеспечивают микроорганизмы источниками углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами.
• Смесь желчных солей ингибирует рост грамположительных микроорганизмов.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
• Фосфаты обеспечивают буферное действие.

Среда рекомендована для выделения Escherichia coli из воды, пищевых продуктов и клинических образцов.

Методика анализа пищевых продуктов

Перед использованием поверхность разлитой среды необходимо высушить.

1. Разведите образец пищевого продукта в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной пептонной водой концентрации 0,1 % (масса/объём), M028.
2. Гомогенизируйте образец в блендере или лабораторном гомогенизаторе типа «стомacher».
3. Перенесите пипеткой 0,5 или 1,0 мл гомогенизированного образца на поверхность чашки.
4. Распределите образец по поверхности стерильным стеклянным шпателем.
5. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч.
6. Продолжите инкубацию при 44 °C в течение 18 ч.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии
• Образцы воды
• Образцы пищевых продуктов

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным методическим руководствам.
• Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методическим руководствам и действующим местным нормативам.
• Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методическим руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция водного раствора концентрации 3,66 % (масса/объём) при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов Escherichia coli, однако отдельные штаммы Escherichia coli могут быть отрицательными по этому признаку.
2. Некоторые виды Salmonella являются β-глюкуронидаза-положительными.
3. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 15–25 °C
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры безопасности

Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального применения.

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила над