ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Предназначена для селективного выделения и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах, воде и клинических образцах без необходимости дальнейшего подтверждения на мембранных фильтрах или с помощью индольного реагента.

Принцип измерения

Среда HiCrome® E.coli Agar разработана на основе триптон-желчного агара. Дифференциация большинства штаммов E. coli от других колиформных бактерий осуществляется по наличию фермента глюкуронидазы, который высокоспецифичен для E. coli.

В состав среды входит хромогенный агент X-глюкуронид. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид, и внутриклеточный фермент глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвобожденный хромофор окрашивает колонии E. coli в сине-зелёный цвет.

Функции компонентов:

• Триптон и специальный пептон: обеспечивают организмы углеродом, азотом, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими необходимыми питательными веществами.
• Смесь желчных солей: подавляет рост грамположительных микроорганизмов.
• Хлорид натрия и фосфаты: поддерживают осмотический баланс и обеспечивают буферное действие.

Область применения

Среда рекомендуется для выделения E. coli из следующих типов образцов:

• Пищевые продукты.
• Пробы воды.
• Клинические образцы (в том числе фекалии).

Методика проведения анализа

Подготовка образцов

1. Поверхность залитой среды перед использованием высушивают.
2. Пищевые образцы разбавляют в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной пептонной водой 0,1 % (масса/объём) |M028| и гомогенизируют в блендере или стомачере.
3. Вносят 0,5 мл или 1,0 мл гомогенизированного образца на поверхность агара и распределяют стерильным стеклянным шпателем.

Инкубация и интерпретация

1. Пластины инкубируют при температуре 30 °C в течение 4 часов.
2. Затем переносят в термостат при температуре 44 °C на 18 часов.
3. Результат: колонии E. coli окрашиваются в сине-зелёный цвет.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендировать 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 44 °C в течение 18–24 часов.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli; небольшое количество штаммов может быть отрицательным по данному признаку.
• Некоторые виды Salmonella могут быть $\beta$-глюкуронидаза-положительными.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты сжиганию перед утилизацией.