ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295-100G (уп/100 гр)

Диагностический хайхром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295-100G (уп/100 г). Рекомендуется для определения и количественного учета Escherichia coli в пищевых продуктах, воде и клинических образцах без необходимости дальнейшего подтверждения на мембранных фильтрах или с помощью индольного реагента.

Принцип измерения

Среда HiCrome® E. coli Agar разработана на основе триптон-желчного агара. Дифференциация большинства штаммов E. coli от других колиформ осуществляется по наличию фермента глюкуронидазы, который обладает высокой специфичностью для E. coli.

В состав среды входит хромогенный агент X-глюкуронид. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид, и внутриклеточный фермент глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвобожденный хромофор окрашивает колонии E. coli в сине-зелёный цвет.

Функции компонентов:

• Триптон и специальный пептон: обеспечивают организм углеродом, азотом, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими важными питательными веществами.
• Смесь желчных солей: подавляет рост грамположительных микроорганизмов.
• Хлорид натрия и фосфаты: поддерживают осмотический баланс и обеспечивают буферное действие.

Методика проведения анализа

Подготовка образцов

1. Поверхность разлитой среды перед использованием высушивают.
2. Пищевые образцы разводят 1:5 или 1:10 стерильной пептонной водой 0,1 % (масса/объем) |M028| и гомогенизируют в блендере или стомачере.
3. Вносят 0,5 мл или 1,0 мл гомогенизированного образца на чашку и распределяют стерильным стеклянным шпателем.

Инкубация и интерпретация

• Инкубируют чашки при 30 °C в течение 4 часов, затем при 44 °C в течение 18 часов.
• Результат: колонии сине-зелёного цвета свидетельствуют о наличии E. coli.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,2 $\pm$ 0,2 для 3,66 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 44 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и типы образцов

Среда предназначена для изоляции и культивирования E. coli из следующих материалов:

• Клинические образцы: фекалии.
• Пробы воды.
• Пищевые продукты.

Ограничения метода

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут быть отрицательными.
• Некоторые виды Salmonella могут быть $\beta$-глюкуронидаза-положительными.
• У некоторых видов может наблюдаться слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия плотно закрывать крышку для предотвращения комкования.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию.