ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295-100G (уп/100 гр)

Селективная питательная среда ХайХром агар для обнаружения и подсчета E. coli HiMedia M1295-100G (уп/100 гр) предназначена для выявления и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах без дополнительного подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реактива. ХайХром агар применяется также для выделения и культивирования E. coli из клинических образцов, проб воды и пищевых продуктов; ограничением метода является возможное отсутствие β-глюкуронидазы у отдельных штаммов E. coli.

Назначение

Среда рекомендована для:

• обнаружения и подсчета Escherichia coli в пищевых продуктах без дальнейшего подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реактива;
• выделения и культивирования E. coli из клинических образцов;
• выделения E. coli из проб воды, пищевых продуктов и клинического материала.

Тип питательной среды: диагностическая.
Назначение изделия: агар.
Сертификат: ФСЗ 2009/03705.

Состав

Состав приведён из расчёта на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация результатов

ХайХром агар для E.coli основан на триптон-желчном агаре и предназначен для обнаружения Escherichia coli в пищевых продуктах. Большинство штаммов E. coli можно дифференцировать от других колиформных бактерий по наличию фермента β-глюкуронидазы, характерного для E. coli.

Хромогенный агент X-глюкуронид позволяет выявлять активность β-глюкуронидазы:

1. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид.
2. Внутриклеточный фермент β-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом.
3. Освободившийся хромофор придаёт колониям E. coli голубовато-зелёную окраску.

Триптон и специальный пептон обеспечивают микроорганизмы источниками углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Смесь желчных солей подавляет грамположительные микроорганизмы. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты обеспечивают буферное действие.

Приготовление среды

1. Взвесьте 36,57 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении около 0,10 МПа (15 фунтов на кв. дюйм) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика подготовки и анализа образцов

Перед использованием поверхность приготовленной среды высушивают.

Для пищевых образцов:

1. Разведите образец пищевого продукта в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной 0,1 % (масс./об.) пептонной водой M028.
2. Гомогенизируйте образец в блендере или гомогенизаторе-стомачере.
3. Нанесите на поверхность чашки 0,5 или 1,0 мл гомогенизированного пищевого образца.
4. Распределите образец стерильным стеклянным шпателем.
5. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч.
6. Продолжите инкубацию при 44 °C в течение 18 ч.
7. Интерпретируйте результаты по росту и окраске колоний.

Колонии E. coli обычно приобретают голубовато-зелёную окраску вследствие активности β-глюкуронидазы.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пробы воды.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.
• Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным документам.
• Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки согласно установленным руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

• β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут быть β-глюкуронидаза-отрицательными.
• Некоторые виды Salmonella являются β-глюкуронидаза-положительными.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за особенностей питательных потребностей.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция: водный раствор с концентрацией 3,66 % масс./об. при 25 °C.
pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 44 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при соблюдении инструкции на этикетке, использовании продукта в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики при работе