Питательная среда Основа ХайХром селективного агара ECC для обнаружения и подсчёта E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1294-500G (уп/500 гр) — сухая порошкообразная основа селективного агара для одновременного выявления Escherichia coli и колиформных бактерий. Применяется для анализа проб воды и пищевых продуктов; для подтверждения E. coli используются реактив Ковача, а также дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Основа ХайХром селективного агара ECC предназначена для обнаружения и подсчёта Escherichia coli и колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктов.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Происхождение компонентов: животное

Состав

Состав среды приведён в расчёте на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

HiCrome® ECC Selective Agar представляет собой селективную среду для одновременного обнаружения Escherichia coli и общего количества колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктов.

Хромогенная смесь содержит два хромогенных субстрата:

• фермент β-D-галактозидаза, вырабатываемый колиформными бактериями, расщепляет один из хромогенов с образованием колоний лососёво-красного цвета;
• фермент α-D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет X-глюкуронид — второй хромоген;
• колонии E. coli приобретают тёмно-синий или фиолетовый цвет вследствие расщепления обоих хромогенов.

L-триптофан усиливает индольную реакцию, повышая надёжность обнаружения. Специальный пептон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азотистые вещества, сбраживаемый углевод и другие необходимые для роста питательные компоненты. Фосфаты выполняют буферную функцию.

Состав среды способствует восстановлению и быстрому росту даже сублетально повреждённых колиформных бактерий. Tergitol подавляет грамположительные, а также некоторые грамотрицательные бактерии, не относящиеся к колиформным. Добавление селективной добавки ECC Selective Supplement (FD190) способствует подавлению сопутствующей неоднородной микрофлоры.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 26,48 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (ориентировочно 0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. При необходимости приготовьте селективную среду, асептически добавив восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки ECC Selective Supplement (FD190) в предварительно охлаждённую до 45–50 °C стерильную среду.
5. Тщательно перемешайте среду.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Приготовленная среда может иметь лёгкую мутность; это не влияет на рабочие характеристики среды.

Методика посева и подтверждения

Среду можно инокулировать одним из следующих способов:

• методом заливных чашек;
• нанесением образца на поверхность застывшей среды в чашке;
• мембранно-фильтрационным методом.

Для подтверждения E. coli нанесите каплю реактива Ковача на тёмно-синюю или фиолетовую колонию. Образование вишнёво-красного окрашивания указывает на положительную реакцию.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов в соответствии с установленными руководствами.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов в соответствии с установленными руководствами и местными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Основные параметры

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение: основа селективного агара ECC
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Происхождение компонентов: животное
• Масса упаковки: 500 г
• Рабочий объём приготовления: 26,48 г на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-розового цвета.

Реакция

Реакция 2,65%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название: Enterobacter aerogenes.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут давать отрицательную реакцию.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать