Основа ХайХром селективного агара ECC для обнаружения и подсчета E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1294-100G (уп/100 гр)

Диагностическая основа ХайХром селективного агара ECC для обнаружения и подсчета Escherichia coli и колиформных бактерий HiMedia M1294-100G. Применяется для анализа проб воды и пищевых продуктов; содержит хромогенную смесь для одновременной идентификации целевых микроорганизмов.

Принцип измерения

Среда HiCrome® ECC Selective Agar основана на использовании двух хромогенных субстратов. Фермент $\beta$-D-галактозидаза, вырабатываемый колиформными бактериями, расщепляет один из хромогенов, в результате чего колонии приобретают цвет от лососевого до красного. Фермент $\beta$-D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет второй хромоген (X-глюкуронид). Колонии E. coli окрашиваются в темно-синий или фиолетовый цвет из-за расщепления обоих хромогенов.

Добавление L-триптофана улучшает индольную реакцию, что повышает достоверность обнаружения. Специальный пептон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азотистые вещества, ферментируемые углеводы и другие питательные компоненты. Фосфаты служат буферной системой. Тергитол (гектадецилсульфат натрия) подавляет рост грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 26,48 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx 0,1$ МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Для получения селективной среды после охлаждения стерильного раствора до 45–50 °C асептически добавьте содержимое одного флакона добавки ECC Selective Supplement (FD190).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри. Примечание: возможная опалесценция (мутность) среды не влияет на её функциональные свойства.

Посев и интерпретация

Инокуляция осуществляется методом поверхностного посева, методом посева в толщу среды или с использованием мембранного фильтра.

Для подтверждения E. coli на темно-синие или фиолетовые колонии наносят каплю реактива Ковакса: появление вишнёво-красного окрашивания свидетельствует о положительной реакции.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: светло-жёлтый или розовый гомогенный порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-розовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• pH водного раствора (2,65 % в/в при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: HiCrome™
• Форма выпуска: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения

Рекомендуется для анализа проб пищевых продуктов и воды. Среда позволяет выявлять даже сублетально поврежденные колиформы, обеспечивая их быстрое восстановление и рост.

Ограничения и требования

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут быть отрицательными.
• Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Меры предосторожности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Назначение: основа среды