Питательная среда «Основа ХайХром селективного агара ECC для обнаружения и подсчета E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1294-100G (уп/100 гр)» предназначена для одновременного обнаружения Escherichia coli и колиформных бактерий в воде и пищевых образцах. Основа применяется в диагностической микробиологии в виде порошка, а для подтверждения E. coli требуются реакция с реактивом Ковача и дополнительные биохимические и серологические исследования.

Назначение

Основа селективного агара ECC HiCrome предназначена для обнаружения и подсчёта Escherichia coli и колиформных бактерий в образцах воды и пищевых продуктов.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: животное

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2

Принцип измерения и интерпретация

Агар HiCrome ECC Selective является селективной средой для одновременного обнаружения Escherichia coli и общего количества колиформных бактерий в образцах воды и пищевых продуктов.

Хромогенная смесь содержит два хромогенных субстрата:

• β-D-галактозидаза, вырабатываемая колиформными бактериями, расщепляет один из хромогенов с образованием колоний лососёво-красного цвета.
• β-D-глюкуронидаза, вырабатываемая E. coli, расщепляет X-глюкуронид — второй хромоген.
• Колонии E. coli приобретают тёмно-синий или фиолетовый цвет вследствие расщепления обоих хромогенов.
• Добавление L-триптофана усиливает индольную реакцию и повышает надёжность обнаружения.
• Специальный пептон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азотистые вещества, ферментируемый углевод и другие необходимые питательные компоненты для роста микроорганизмов.
• Фосфаты выполняют буферную функцию.
• Формула среды способствует восстановлению и быстрому росту даже сублетально повреждённых колиформных бактерий.
• Тергиitol ингибирует грамположительные, а также некоторые грамотрицательные бактерии, не относящиеся к колиформным.
• Добавление селективной добавки ECC (FD190) способствует подавлению сопутствующей гетерогенной микрофлоры.

Посев выполняют методом заливки чашек или поверхностным распределением образца по приготовленной среде. Допускается также мембранно-фильтрационный метод.

Для подтверждения E. coli на колонию тёмно-синего или фиолетового цвета наносят каплю реактива Ковача. Образование вишнёво-красной окраски указывает на положительную реакцию.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию 26,48 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов, ориентировочно ≈0,10 МПа.
4. При необходимости селективную среду приготовьте асептическим добавлением регидратированного содержимого одного флакона селективной добавки ECC (FD190) в предварительно охлаждённую до 45–50 °C стерильную среду.
5. Тщательно перемешайте среду.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

После приготовления среда может иметь лёгкую мутность; это не влияет на рабочие характеристики.

Типы образцов

• Пищевые образцы
• Образцы воды

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-розового цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 2,65 % при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 15–25 °C
• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытом контейнере
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Условия после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта
• Место хранения: сухое, проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Неправильное хранение может привести к образованию комков. Рабочие характеристики