ХайХром агар ECC для дифференциации E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1293-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда ХайХром агар ECC для дифференциации E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1293-500G (уп/500 гр) предназначена для предположительной идентификации Escherichia coli и других колиформных бактерий. Применяется при анализе пищевых продуктов и объектов окружающей среды; результат требует подтверждения дополнительными биохимическими и серологическими тестами.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциальной и предположительной идентификации Escherichia coli и других колиформных бактерий в пищевых продуктах и образцах окружающей среды.

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Соответствие: ГОСТ Р 54354-2011
• Тип образцов: пищевые продукты, образцы окружающей среды

Состав

Состав, г/л:

Состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Escherichia coli относится к семейству Enterobacteriaceae и входит в состав нормальной микрофлоры кишечного тракта человека и различных животных. Большинство штаммов E. coli не вызывает желудочно-кишечных заболеваний, однако отдельные группы E. coli могут приводить к тяжёлой диарее, осложнениям и инвалидизации.

Среда содержит два хромогена:

• один хромоген расщепляется ферментом глюкуронидазой, который продуцируется E. coli, с образованием колоний синего или фиолетового цвета;
• второй хромоген расщепляется ферментом галактозидазой, продуцируемым большинством колиформных бактерий, с образованием колоний розового или розово-красного цвета.

Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами. Лактоза является сбраживаемым углеводом и используется для выявления лактозосбраживающих микроорганизмов; нейтральный красный служит индикатором. Гидрофосфат натрия и дигидрофосфат калия обеспечивают буферную ёмкость среды. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Поверхность приготовленной агаризованной среды должна быть сухой.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 55,83 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении около 0,10 МПа (15 фунтов на кв. дюйм) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика анализа пищевых образцов

1. Разведите образец пищевого продукта в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной пептонной водой концентрации 0,1 % (M028).
2. Гомогенизируйте образец в блендере или стомачере.
3. Нанесите 0,5 или 1,0 мл гомогената на поверхность агара.
4. Равномерно распределите гомогенат стерильным стеклянным шпателем.
5. Инкубируйте чашки при 37 °C в течение 18–24 ч.
6. Подсчитайте колонии синего или фиолетового цвета.
7. Умножьте полученное количество колоний на коэффициент разведения.
8. Количество E. coli выражайте в расчёте на 1 г пищевого продукта.

Технические характеристики

• Наименование: HiCrome ECC Agar
• Модель/артикул: M1293-500G
• Масса упаковки: 500 г
• Конечный pH приготовленной среды при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 5,58 % м/об

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный, сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется непрозрачный гель красновато-розового цвета.

Реакция среды

Реакцию определяют для водного раствора концентрации 5,58 % м/об при 25 °C.

• Значение pH: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно действующим методическим указаниям.

Для образцов окружающей среды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки согласно действующим методическим указаниям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

• Фермент β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут давать отрицательную реакцию.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.
• Для подтверждения результата необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Ёмкость: плотно закрытая
• Условия помещения: сухое, хорошо проветриваемое место
• Защита при хранении: от экстремальных температур и источников воспламенения
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке

После вскрытия необходимо плотно закрывать флакон и хранить