ХайХром агар ECC для дифференциации E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1293-100G (уп/100 гр)

Дифференциальная питательная среда ХайХром агар ECC для дифференциации E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1293-100G (уп/100 гр) предназначена для предположительной идентификации Escherichia coli и других колиформных бактерий. Среда применяется при анализе пищевых продуктов и образцов окружающей среды; идентификация основана на образовании синих или фиолетовых колоний E. coli и розово-красных колоний большинства колиформных бактерий.

Назначение и область применения

HiCrome ECC Agar M1293-100G — дифференциальная агаризованная питательная среда для предположительной идентификации Escherichia coli и других колиформных бактерий в пищевых продуктах и образцах окружающей среды.

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: агар
• Тип образцов: пищевые продукты и образцы окружающей среды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Нормативная база, указанная для изделия: ГОСТ Р 54354-2011

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Escherichia coli относится к семейству Enterobacteriaceae и входит в состав нормальной микрофлоры кишечного тракта человека и различных животных. Большинство штаммов E. coli не вызывает желудочно-кишечных заболеваний, однако отдельные группы E. coli могут вызывать тяжёлую диарею и приводить к серьёзным последствиям или инвалидности.

Среда содержит два хромогена:

• один хромоген расщепляется ферментом глюкуронидазой, продуцируемой E. coli, с образованием колоний синего или фиолетового цвета;
• второй хромоген расщепляется ферментом галактозидазой, продуцируемой большинством колиформных бактерий, с образованием колоний розово-красного цвета.

Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми веществами, аминокислотами с длинной цепью, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами. Лактоза является сбраживаемым углеводом и способствует выявлению лактозосбраживающих микроорганизмов; нейтральный красный используется как индикатор. Гидрофосфат натрия и дигидрофосфат калия обеспечивают буферные свойства среды. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 55,83 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. Высушите поверхность чашек с приготовленной средой.

Методика анализа пищевых образцов

1. Разбавьте пищевой образец в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной 0,1%-ной пептонной водой M028.
2. Гомогенизируйте образец в блендере или стомачере.
3. Нанесите 0,5 или 1,0 мл гомогената на поверхность агара стерильным стеклянным шпателем.
4. Инкубируйте чашки при 37 °C в течение 18–24 ч.
5. Подсчитайте синие и фиолетовые колонии.
6. Умножьте полученное количество колоний на коэффициент разбавления.
7. Количество E. coli указывайте в расчёте на 1 г пищевого продукта.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим методическим указаниям.

Для образцов окружающей среды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим методическим указаниям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и сухим продуктом используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с сухим продуктом надевайте маску.
• Избегайте контакта сухого продукта с глазами.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими методическими указаниями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Ограничения метода

• β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут быть β-глюкуронидазоотрицательными.
• Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.
• Для подтверждения идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется непрозрачный гель красновато-розового цвета.

Реакция

Реакция 5,58%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Характеристики продукта

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.