ХайХром агар ECC для дифференциации E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1293-100G (уп/100 гр)

Дифференциальная питательная среда ХайХром агар ECC для дифференциации E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1293-100G. Применяется для предварительной идентификации Escherichia coli и других колиформ в пищевых продуктах и пробах окружающей среды; соответствует ГОСТ Р 54354-2011.

Принцип измерения и интерпретация

Среда HiCrome® ECC Agar предназначена для дифференциации Escherichia coli (представителя семейства Enterobacteriaceae) и других колиформ. В состав среды входят два хромогенных субстрата:

• Один из хромогенов расщепляется ферментом $\beta$-глюкуронидазой, вырабатываемым E. coli, что приводит к образованию колоний синего или пурпурного цвета.
• Второй хромоген расщепляется ферментом $\beta$-галактозидазой, вырабатываемым большинством колиформ, в результате чего формируются розово-красные колонии.

Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают организм азотом, углеродом, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами группы B и другими питательными веществами. Лактоза служит ферментируемым углеводом для обнаружения лактозоположительных микроорганизмов, а нейтральный красный выступает в роли индикатора. Гидрофосфат натрия и дигидрофосфат калия поддерживают pH среды, а хлорид натрия обеспечивает осмотический баланс.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка

1. Разбавьте образец пищевого продукта в соотношении 1:5 или 1:10 с использованием 0,1 % стерильной пептонной воды (M028).
2. Гомогенизируйте пробу в блендере или стомачере.

Посев и инкубация

1. Нанесите 0,5 мл или 1,0 мл гомогената на поверхность агара с помощью стерильного стеклянного шпателя.
2. Инкубируйте чашки при температуре 37 °C в течение 18–24 часов.
3. Подсчитайте количество синих/пурпурных колоний и умножьте на коэффициент разведения. Результат выражается в количестве E. coli на грамм продукта.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 55,83 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

• Тип среды: дифференциальный агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-желтого до розового цвета
• Цвет готовой среды: красно-розовый, непрозрачный гель
• pH готовой среды (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2 (диапазон 6,60–7,00)
• Свойства геля: плотный, сопоставим с 1,5 % агаровым гелем

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч (возможен дальнейший рост до 8 недель) с содержанием 5–10 % $\text{CO}_2$.

Ограничения и предостережения

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli, однако некоторые штаммы могут быть отрицательными.
• Некоторые виды сапрофитов и грамположительные контаминанты (например, стрептококки) или грамотрицательные бациллы могут расти на данной среде.
• Протеолитические загрязнения могут вызвать локальное или полное переваривание среды.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Хранение и утилизация

• Хранение: при получении хранить при температуре 2–8 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия плотно закрывать крышку во избежание образования комков.
• Утилизация: все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или сожжены в соответствии с правилами работы с инфекционными материалами.