Основа бульона для выделения E.coli 0157:H7 HiMedia M1286i-500G (уп/500 гр)

Элективная основа питательной среды HiMedia M1286i-500G для выделения Escherichia coli O157:H7 представляет собой порошок для приготовления обогащающего бульона. Среда применяется при анализе пищевых продуктов и кормов для животных; готовый бульон требует стерилизации автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин и последующего внесения селективной добавки.

Назначение

Modified Soyabean Bile Broth Base — основа обогащающей среды для обнаружения Escherichia coli O157:H7 в пищевых продуктах и кормах для животных.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 16654:2001, поправки 2:2023, и ISO 11133:2014 (Е). Среда предназначена для обогащения и последующего выделения Escherichia coli O157:H7.

• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: основа
• Форма выпуска: порошок
• Упаковка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение: животное

Состав

Состав на 1 л среды:

• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Примечание: формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.
• # Эквивалентно ферментативному гидролизату казеина.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 16,5 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NO 20 Selective Supplement (FD290).
6. Тщательно перемешайте и разлейте приготовленную среду в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Escherichia coli обычно присутствует в кишечнике человека и теплокровных животных. У человека бактерия вызывает ряд кишечных и внекишечных инфекций.

По вирулентным свойствам штаммы Escherichia coli подразделяют на энтеротоксигенные (ETEC), энтеропатогенные (EPEC), энтероинвазивные (EIEC), веротоксигенные (VTEC) и энтерогеморрагические (EHEC). Escherichia coli O157:H7 относится к энтерогеморрагическим штаммам и связан с пищевыми инфекциями. Из-за тяжёлого течения клинических симптомов и высокой контагиозности возбудителей обнаружение EHEC имеет возрастающее клиническое значение.

Основа Modified Soyabean Bile Broth Base разработана для обогащения и выделения Escherichia coli O157:H7. Казитоза и соевый пептон обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами для роста. D-глюкоза служит ферментируемым углеводом и источником энергии. Смесь желчных солей подавляет грамположительные бактерии. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, а фосфат обеспечивает буферную ёмкость среды. Новобиоцин повышает селективность среды.

При предполагаемом низком содержании Escherichia coli O157:H7 пищевой образец обогащают в Modified Soyabean Bile Broth, после чего высевают на селективную среду, например агар МакКонки с сорбитолом (Sorbitol MacConkey Agar, M2981) или агар для энтерогеморрагических Escherichia coli (Hemorrhagic coli Agar, HC Agar, M1158), для выделения и идентификации.

Методика проведения анализа

Обогащение пищевого образца и первичный высев

1. Измельчите 25 г исследуемого пищевого образца в 224 мл Modified Soyabean Bile Broth.
2. Инкубируйте при перемешивании со скоростью около 100 об/мин при 37 °C в течение 18–24 ч.
3. Приготовьте разведения культуры обогащения с использованием фосфатного буфера.
4. Нанесите по 0,1 мл каждого разведения на чашки с агаром HC.
5. Инкубируйте чашки при 43 °C в течение 24 ч.

Методика по ISO 16654:2001 и поправке 2:2023

1. Гомогенизированную исследуемую порцию обогатите в Modified Soyabean Bile Broth Base (M1286I), инкубируя при 41,5 ± 1 °C в течение 6 ч, а затем продолжите инкубацию ещё 12–18 ч.
2. Выполните выделение на основе агара МакКонки с сорбитолом (MacConkey Sorbitol Agar Base, M2981).
3. Инкубируйте посевы при 37 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч.
4. Подтвердите полученные колонии биохимической характеристикой.

Тип образца

• Пищевые образцы.

Контроль качества

Внешний вид и свойства приготовленной среды

• Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,3 % масс./об. при 25 °C.
• pH по реакции: 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли после инкубации при 41,5 ± 1 °C в течение 6 ч для проверки продуктивности и в течение 21 + 3 ч для проверки селективности (M12861), а также при 37 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч на M2981 с добавлением селективной добавки NO 20 Selective Supplement (FD290).