Основа бульона для выделения E.coli 0157:H7 HiMedia M1286i-500G (уп/500 гр)

Элективная основа бульона для выделения E. coli 0157:H7 HiMedia M1286i-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Применяется в качестве среды обогащения для обнаружения Escherichia coli O157:H7 в пищевых продуктах и кормах для животных; состав и критерии эффективности соответствуют стандартам ISO 16654:2001, Amd 2:2023 и ISO 11133:2014.

Принцип измерения

Среда предназначена для обогащения и изоляции энтерогеморрагического штамма E. coli O157:H7, вызывающего тяжелые пищевые токсикоинфекции.

• Казеиновый гидролизат (Casitose) и соевый пептон: обеспечивают углеродные и азотистые соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие необходимые питательные вещества.
• D-глюкоза: служит ферментируемым углеводом и источником энергии.
• Смесь желчных солей: подавляет рост грамположительных бактерий.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Фосфатный буфер: стабилизирует pH среды.
• Новобиоцин: обеспечивает селективность среды.

При подозрении на низкое содержание E. coli O157:H7 пробу обогащают в данном бульоне с последующим посевом на селективные среды, такие как сорбито-макконкиевский агар (M2981) или агар для геморрагической кишечной палочки (HC) (M1158).

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 16,5 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C и асептически добавить содержимое одной ампулы селективной добавки NO 20 (FD290).
5. Тщательно перемешать и разлить по емкостям.

Процедура анализа

1. Смешать 25 г исследуемого образца пищевого продукта с 224 мл бульона M1286i.
2. Инкубировать при 37 °C в течение 18–24 часов при перемешивании (около 100 об/мин).
3. Приготовить разведения обогащенной культуры с помощью фосфатного буфера.
4. Высеять по 0,1 мл каждого разведения на чашки с HC-агаром и инкубировать при 43 °C в течение 24 часов.

Альтернативный метод (согласно ISO 16654:2001 & Amd 2:2023)

1. Обогащение гомогенизированной пробы в бульоне M1286i при температуре 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 6 часов, затем еще в течение 12–18 часов.
2. Изоляция на сорбито-макконкиевский агар (M2981). Инкубация при 37 $\pm$ 1 °C в течение 21 $\pm$ 3 часов.
3. Подтверждение колоний с помощью биохимической характеристики.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Происхождение компонентов: животное
• Форма выпуска: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики оценивались после инкубации при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 6 часов (продуктивность) и 21 $\pm$ 3 часов (селективность) для M1286i, а также при 37 $\pm$ 1 °C в течение 21 $\pm$ 3 часов для M2981 с добавлением селективной добавки NO 20 (FD290).

Тестирование продуктивности и селективности (M1286i)

Характеристики роста на M2981

* — соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Требования к помещению: сухое, вентилируемое помещение, защищенное от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дальнейшего субкультивирования.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация отработанных сред должна осуществляться путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.

Комплект поставки и совместимость

• Основа бульона M1286i-500G (500 г).
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.

Дополнительные компоненты (поставляются отдельно):

• FD096 Новобиоциновая добавка (Novobiocin Supplement) / Селективная добавка NO 20 (FD290)