Основа бульона для выделения E.coli 0157:H7 (модифицированная) HiMedia M1286-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа бульона для выделения E.coli 0157:H7 (модифицированная) HiMedia M1286-500G (уп/500 гр)» — элективная основа с конечным pH 7,3 ± 0,2. Применяется для обогащения и выделения Escherichia coli O157:H7 из клинических и пищевых образцов с последующим высевом на селективные среды.

Назначение

Среда предназначена для обогащения и выделения Escherichia coli O157:H7. Тип питательной среды: элективный. Назначение изделия: основа.

Применение:

• клинические образцы — кал;
• пищевые образцы.

Изделие предназначено для диагностики in vitro и профессионального применения. Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03706.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

• Масса среды для приготовления: 32,62 г на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
• Реакция среды: 3,26 % масс./об. водного раствора при 25 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Принцип действия

Основа бульона для выделения Escherichia coli O157:H7 разработана для обогащения и выделения микроорганизма в соответствии с рекомендациями Бактериологического аналитического руководства FDA.

• Триптон и соевый пептон обеспечивают среду углеродсодержащими и азотсодержащими соединениями, а также другими необходимыми питательными веществами.
• Декстроза является ферментируемым углеводом и источником энергии.
• Смесь желчных солей подавляет рост грамположительных бактерий.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Фосфат обеспечивает буферную способность среды.
• Новобиоцин повышает селективность среды.

При подозрении на низкое содержание Escherichia coli O157:H7 пищевой образец обогащают в соево-желчном бульоне, после чего выполняют высев на селективную среду, например агар МакКонки с сорбитолом (M2981) или агар для геморрагической кишечной палочки (HC) (M1158), для выделения и идентификации микроорганизма.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию 32,62 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте приготовленную среду автоклавированием при давлении 15 psi (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки NO 20 (FD290).
6. При необходимости для выделения Escherichia coli O157 из пищевых продуктов в асептических условиях добавьте регидратированное содержимое 1 флакона добавки CCV (FD247).
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду необходимым способом.

Пробоподготовка и проведение анализа

1. Гомогенизируйте 25 г исследуемого пищевого образца в 224 мл соево-желчного бульона.
2. Инкубируйте суспензию при встряхивании примерно со скоростью 100 об/мин при 37 °C в течение 18–24 ч.
3. Приготовьте разведения обогащённой культуры с использованием фосфатного буфера.
4. Нанесите по 0,1 мл каждого разведения на чашки с агаром HC или агаром МакКонки с сорбитолом (M2981).
5. Инкубируйте чашки при 43 °C в течение 24 ч.
6. Для выделения и подтверждения Escherichia coli O157:H7 используйте селективный агар МакКонки с сорбитолом (M2981), а также выполните биохимические и серологические тесты.

После завершения работы загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета.
• Реакция: реакция 3,26 % масс./об. водного раствора при 25 °C.
• pH: 7,10–7,50.
• Конечный pH: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C или 41,5 °C в течение 18–48 ч с добавлением селективной добавки NO 20 (FD290) и, при необходимости, добавки CCV (FD247). Восстановление выполняют на агаре МакКонки с сорбитолом (M2981).

• Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на этой среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При использовании среды для выявления микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований и условий применения.
3. Обогащённый образец необходимо высевать на агар МакКонки с сорбитолом (M2981); для подтверждения результата следует выполнять биохимические и серологические исследования.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Для обеспечения рабочих характеристик рекомендуется использовать продукт в пределах установленного срока годности.

Безопасность и обращение

При работе с образцами и культурами необходимо:

• использовать защитные перчатки;
• носить защитную одежду;
• использовать средства защиты глаз и лица;
• соблюдать надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории;
• при обращении с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами;
• учитывать требования, приведённые в соответствующих паспортах безопасности.

Утили