Основа бульона для выделения E.coli 0157:H7 (модифицированная) HiMedia M1286-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда Основа бульона для выделения E.coli 0157:H7 (модифицированная) HiMedia M1286-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Рекомендуется для накопления и выделения Escherichia coli O157:H7 из клинических и пищевых образцов.

Принцип работы

Основа бульона Soyabean Bile Broth Base разработана в соответствии с рекомендациями FDA для обогащения и выделения E. coli O157:H7.

• Тритон и соевый пептон обеспечивают необходимые углеродные, азотистые соединения и другие питательные вещества для роста.
• Декстроза (глюкоза) служит источником энергии и ферментируемым углеводом.
• Смесь желчных солей подавляет рост грамположительных бактерий.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты обеспечивают стабильное буферирование среды.
• Селективность среды обеспечивается добавлением новобиоцина.

При подозрении на низкое содержание E. coli O157:H7 образец обогащают в данном бульоне с последующим посевом на селективные среды, такие как сорбитовый МакКонки-агар (M2981) или геморрагический коли-агар (HC) (M1158), для окончательной изоляции и идентификации.

Состав

Состав, г/л:

Значение pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Растворить 32,62 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое одного флакона регидратированной селективной добавки NO 20 (FD290).
6. При необходимости (для выделения E. coli O157 из пищевых продуктов) асептически добавить содержимое одного флакона добавки CCV (FD247).
7. Тщательно перемешать и разлить по стерильным емкостям.

Процедура анализа

1. Смешать 25 г пищевого образца с 224 мл бульона Soyabean Bile Broth.
2. Инкубировать при 37 °C в течение 18–24 часов с перемешиванием (около 100 об/мин).
3. Приготовить разведения обогащенной культуры с использованием фосфатного буфера.
4. Высеять по 0,1 мл каждого разведения на чашки с HC-агаром или сорбитовым МакКонки-агаром (M2981).
5. Инкубировать при 43 °C в течение 24 часов.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C или 41,5 °C в течение 18–48 часов с добавлением селективной добавки NO 20 (FD290) и, при необходимости, добавки CCV (FD247). Повторный рост (recovery) определяли на сорбитовом МакКонки-агаре (M2981).

* Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа клинических образцов (фекалии) и пищевых продуктов.

Ограничения:

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность на данной среде.
• Каждая партия среды протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA); для специфических требований пользователя рекомендуется провести собственную валидацию.
• Обогащенные образцы в обязательном порядке должны быть посеяны на сорбитовый МакКонки-агар (M2981) с последующим проведением биохимических и серологических тестов для подтверждения.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.

Комплект поставки и совместимость

По заявке поставляется:

• FD096 Новобиоциновая добавка (Novobiocin Supplement)

Для полноценной работы среды требуются следующие добавки:

• Селективная добавка NO 20 (FD290).
• Добавка CCV (FD247) — для анализа пищевых продуктов.