Основа модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса HiMedia M1282-500G (уп/500 гр)

Основа модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса HiMedia M1282-500G (уп/500 гр) предназначена для выявления подвижных видов Salmonella в пищевых продуктах, фекалиях и пробах окружающей среды. Полусинтетическая среда позволяет обнаруживать большее количество положительных проб на Salmonella, чем стандартные процедуры обогащения; конечный pH составляет 5,2 ± 0,2.

Принцип измерения и интерпретация

Среда подготовлена согласно формуле DeSmedt et al. для выявления подвижных видов Salmonella. Принцип работы основан на способности представителей рода Salmonella мигрировать в селективной среде, конкурируя с другими подвижными организмами, что приводит к образованию непрозрачных ореолов роста.

• Питательные компоненты: триптоза и триптон обеспечивают азот, углерод и другие необходимые питательные вещества.
• Буферизация: фосфаты поддерживают стабильный pH среды.
• Селективность: оксалат малахитового зеленого и новобиоцин подавляют рост многих грамположительных бактерий.

Среда не подходит для обнаружения неподвижных штаммов Salmonella. Для повышения эффективности выделения из фекалий рекомендуется использовать среду в сочетании с прямым посевом и обогащением в бульоне селенита F (M052A) с последующим субкультивированием на агаре XLD (M031) или маннит-лизин-агаре (M1071).

Методика проведения анализа

1. Приготовление: суспендируйте 31,66 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Нагрейте до кипения при постоянном перемешивании до полного растворения. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ.
2. Добавки: охладите среду до 45–50 °C и асептически добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки № 20 (FD290) или 4 флаконов селективной добавки № 5 (FD096).
3. Разлив: тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.
4. Подготовка поверхности: высушите поверхность среды на воздухе при комнатной температуре не менее одного часа.
5. Посев: нанесите 3 капли (0,1 мл) культуры предварительного обогащения (возрастом 16–20 часов) отдельными точками на поверхность высушенной среды.
6. Инкубация: инкубируйте чашки в вертикальном положении при 42 °C до 24 часов.
7. Результат: подвижные бактерии образуют ореол или зону роста, исходящую из точки инокуляции. Виды Salmonella образуют колонии соломенного цвета.
8. Подтверждение: субкультивирование для подтверждения чистоты и проведения биохимических/серологических тестов проводят с внешнего края ореола.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-желтого до светло-голубого цвета.
• Желирование: полужидкий гель, сопоставим с гелем 0,27 % агара.
• Цвет и прозрачность: прозрачный или слегка опалесцирующий полужидкий гель зеленовато-голубого цвета (возможен небольшой осадок).
• Реакция: pH 5,2 ± 0,2 (3,16 % водный раствор при 25 °C).
• Диапазон pH: 5,00–5,40.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 42–43 °C в течение 18–24 часов с добавлением селективной добавки № 20 (FD290) или № 5 (FD096).

Область применения и образцы

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы: мясо и мясопродукты.

При сборе и обработке образцов следует руководствоваться установленными стандартами и рекомендациями по микробиологическому анализу пищевых продуктов и клинических материалов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от перегрева и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.

Ограничения и предостережения

1. Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за вариативности потребностей в питательных веществах.
2. Из-за низкого содержания агара чашки должны инкубироваться строго в вертикальном и устойчивом положении.
3. Использование невысушенных на воздухе чашек может привести к ошибочным результатам.
4. Только для профессионального использования in vitro. При работе использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
5. Контаминированные материалы перед утилизацией подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию.