Основа модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса HiMedia M1282-500G (уп/500 гр)

Компонент питательной среды «Основа модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса HiMedia M1282-500G (уп/500 гр)» — порошковая полужидкая среда для выявления подвижных видов Salmonella. Применяется при анализе пищевых продуктов, фекалий и объектов окружающей среды, но не подходит для выявления неподвижных штаммов Salmonella.

Назначение

Среда предназначена для выявления подвижных видов Salmonella в пищевых продуктах, фекалиях и образцах окружающей среды.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: флакон из ПЭВП (полиэтилена высокой плотности)

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 5,2 ± 0,2
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 3,16 % масс./об.
• Содержание агара: 0,27 %
• Гелеобразование: полужидкий гель, сопоставимый с 0,27%-ным агаровым гелем

Принцип действия и интерпретация

Модифицированная полужидкая среда Раппапорта—Вассилиадиса приготовлена по рецептуре, описанной DeSmedt и соавторами, для выявления подвижных видов Salmonella в пищевых продуктах и образцах окружающей среды.

Триптоза и триптон обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, а также другими необходимыми питательными веществами. Фосфат обеспечивает высокую буферную ёмкость среды. Оксалат малахитового зелёного и новобиоцин подавляют рост многих грамположительных бактерий.

Принцип работы основан на способности видов Salmonella мигрировать в селективной среде, конкурируя с другими подвижными микроорганизмами, с образованием мутных ореолов или зон роста вокруг места посева. Среда выявляет больше положительных на Salmonella образцов по сравнению с обычно применяемыми процедурами обогащения.

Среду можно использовать в сочетании с прямым посевом и обогащением в селенитовом бульоне F (Selenite F Broth, M052A) для выделения видов Salmonella из фекалий. Пересев на ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар XLD (M031) или маннитол-лизиновый агар (M1071) позволяет повысить извлечение микроорганизмов. Среда не предназначена для выявления неподвижных штаммов Salmonella.

Колонии видов Salmonella имеют соломенно-жёлтую окраску. Пересевы для подтверждения чистоты культуры и последующих биохимических и серологических исследований выполняют с внешнего края ореола роста.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте поверхность среды: после разливки выдержите чашки с нанесённой средой при комнатной температуре не менее 1 ч для воздушной сушки.
2. Нанесите по 3 капли (0,1 мл) предобогатительной культуры возрастом 16–20 ч на отдельные участки высушенной поверхности среды.
3. Инкубируйте чашки в вертикальном и устойчивом положении при 42 °C не более 24 ч.
4. Оцените рост вокруг места инокуляции: подвижные бактерии формируют ореол или зону роста, распространяющуюся от точки посева.
5. При необходимости выполните пересев с внешнего края ореола для подтверждения чистоты культуры и проведения дальнейших биохимических и серологических тестов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 31,66 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения при частом перемешивании до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NO 20 (FD290) или четырёх флаконов селективной добавки NO 5 (FD096).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
8. Высушите разлитую среду на воздухе при комнатной температуре не менее 1 ч.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии
• Пищевые образцы: мясо и мясные продукты
• Образцы окружающей среды

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Применение: диагностика in vitro.
• Назначение: только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к руководствам по безопасности в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Из-за различий в потребностях микроорганизмов в питательных веществах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост на этой среде.
2. Чашки необходимо инкубировать в вертикальном и устойчивом положении, поскольку среда содержит уменьшенное количество агара.
3. Следует использовать высушенные на воздухе чашки; в противном случае возможны ошибочные результаты.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-синий однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий полужидкий гель зеленовато-синего цвета; возможно наличие небольшого осадка.

Реакция

• Условия определения: реакция 3,16%-ного масс./об. водного раствора при 25 °C
• Значение pH: 5,2 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 5,00–5,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 42–43 °C в течение 18–24 ч с добавлением селективной добавки NO 20 (FD290) или NO 5 (FD096).