Основа циклосерин-азидного триптозного агара HiMedia M1279-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа циклосерин-азидного триптозного агара HiMedia M1279-500G (уп/500 гр) — порошковая основа для количественного определения сульфитредуцирующих анаэробов, главным образом клостридий. Среда применяется после стерилизации и асептического добавления 1,5 мл восстановленного содержимого флакона добавки T.S.C. Supplement (FD014), обеспечивающей селективное подавление ряда сопутствующих микроорганизмов.

Назначение

Основа циклосерин-азидного триптозного агара предназначена для подсчёта сульфитредуцирующих анаэробов, прежде всего представителей рода Clostridium. Готовая среда с добавкой T.S.C. Supplement (FD014) используется для выявления роста анаэробов по восстановлению сульфита и образованию чёрных колоний.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Происхождение: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Среда первоначально разработана Hauschild и Hilsheimer. Впоследствии состав был модифицирован: снижены концентрации D-циклосерина, сульфита и железа, а также добавлен азид натрия.

Селективное действие среды основано на ингибирующих свойствах D-циклосерина и азида натрия, а индикация восстановления сульфита реализуется системой «сульфит — железо». Рост немезофильных организмов подавляется, тогда как Clostridium perfringens и родственные виды восстанавливают сульфит и образуют чёрные колонии вследствие образования сульфида железа(II).

Триптоза, папаиновый перевар соевой муки, мясной и дрожжевой экстракты обеспечивают анаэробные микроорганизмы необходимыми азотистыми соединениями и витаминами. Глюкоза служит источником углерода. Дисульфит натрия восстанавливается до сероводорода (H₂S), который взаимодействует с ионами железа солей железа с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа(II).

D-циклосерин, входящий в состав добавки FD014, и азид натрия ингибируют ряд микроорганизмов, включая виды Bacillus, кишечные палочки, Proteus, Pseudomonas и большинство кокков. Некоторые анаэробы восстанавливают сульфит до сероводорода (H₂S); этот процесс проявляется почернением колоний в присутствии цитрата аммония-железа.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,52 г порошка в 500 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 1,5 мл восстановленного содержимого одного флакона добавки T.S.C. Supplement (FD014) на 500 мл среды.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Меры предосторожности

Азид натрия способен образовывать взрывоопасные азиды металлов с материалами трубопроводов. Одноразовые расходные материалы после использования рекомендуется промывать достаточным количеством воды для удаления остатков азида.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до коричневато-жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,4 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель от жёлтого до янтарного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,7 % м/о при 25 °C.
• pH: 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с добавлением T.S.C. Supplement (FD014).

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Условия хранения приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.