HiMedia M1276-100G Основа жидкой среды Соттона

Основа жидкой среды Соттона HiMedia M1276-100G для культивирования и количественного определения микобактерий в соответствии с Индийской фармакопеей (IP). Применяется для определения количества колониеобразующих единиц (КОЕ) в вакцинах известной активности; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Разбавленная среда Соттона используется для определения числа КОЕ в вакцинах. Соли, такие как цитрат аммония железа (III) и сульфат магния, обеспечивают необходимые неорганические ионы и источники азота для роста микобактерий. L-аспарагин добавлен для стимуляции инициации роста и увеличения его скорости.

Методика проведения анализа

Согласно методу Индийской фармакопеи (IP):

1. Содержимое лиофилизированной вакцины для людей восстанавливают с помощью разбавителя, указанного на флаконе.
2. Содержимое пяти таких контейнеров объединяют.
3. Готовят три разведения объединенной вакцины, используя жидкую среду Соттона, чтобы получить оптимальное количество колоний (100, 40 и 20) из посевной дозы 0,2 мл.
4. Посевную дозу 0,2 мл каждого разведения высевают на поверхность скоса среды Лёвенштейна-Йенсена (L.J. Medium, |M162|) и инкубируют при 37 °C в течение 28 дней.
5. Вакцина проходит тест, если 0,1 мл восстановленной вакцины содержит от 1 × 10⁵ до 33 × 10⁵ КОЕ.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 3,19 г сухой среды (эквивалентный вес на 1 литр) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 20 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам или колбам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Технические характеристики

Физико-химические показатели

• Внешний вид: белый или кремовый однородный свободнотекучий порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды: бесцветный прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.
• pH (водный раствор 0,32 % мас. при 25 °C): 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Состав

Состав, г/л:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 2 недель.

Область применения

• Тип образца: клинические образцы (мокрота).
• Сбор и обработка: при работе с клиническим материалом следует соблюдать установленные руководства по обращению с биообразцами.
• Назначение: диагностика in vitro, профессиональное использование в микробиологических лабораториях.

Ограничения и предупреждения

1. Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
2. Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
3. Каждая партия среды протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести валидацию среды.
4. Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +15…+30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами.