HiMedia M1273S-500G Модифицированный селективный агар для Pseudomonas с C

Питательная среда HiMedia M1273S-500G «Модифицированный селективный агар для Pseudomonas с C» — двухкомпонентный порошковый агар с цетримидом для выявления и количественного определения Pseudomonas aeruginosa в воде. Среда обеспечивает ингибирование Escherichia coli и Stenotrophomonas maltophilia, а идентификацию Pseudomonas aeruginosa проводят по образованию сине-зелёного пигмента пиоцианина после инкубации 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Назначение

Модифицированный селективный агар с цетримидом предназначен для выявления и количественного определения Pseudomonas aeruginosa в воде. Среда рекомендована BIS — Бюро индийских стандартов.

Состав

Состав компонентов Part A и Part B:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте раствор Part B: суспендируйте 19,8 г Part B в 250 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте раствор до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте раствор Part B автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа, ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 20 мин.
4. Приготовьте раствор Part A: суспендируйте 100 г Part A в 750 мл дистиллированной воды.
5. Стерилизуйте раствор Part A автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа, ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 5 мин.
6. После автоклавирования охладите оба компонента до 50 °C.
7. В асептических условиях добавьте раствор Part A в раствор Part B.
8. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда сформулирована для выявления и количественного определения Pseudomonas aeruginosa в воде. Штаммы Pseudomonas aeruginosa идентифицируют по образованию пиоцианина. Pseudomonas aeruginosa является единственным известным видом рода Pseudomonas или грамотрицательным представителем палочковидных бактерий, выделяющим пиоцианин.

Pseudomonas aeruginosa гидролизует казеин и образует диффундирующий пигмент от жёлтого до зелёного цвета. Для анализа выполняют пересев петлёй культуры из пробирок с асparagine proline broth M1192 на чашки с молочным агаром. Для пересева используют пробирки, в которых наблюдаются рост или флуоресценция. После инкубации оценивают образование пигмента.

Пептический перевар тканей животного происхождения, дрожжевой экстракт и сухое обезжиренное молоко обеспечивают поступление азота, серы, витаминов и других питательных веществ, необходимых для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Цетримид, или цетилтриметиламмония бромид, представляет собой четвертичное аммониевое соединение, ингибирующее широкий спектр микроорганизмов, включая виды Pseudomonas, отличные от Pseudomonas aeruginosa.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики M1273S оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Контроль качества

Внешний вид

• Part A: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.
• Part B: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется кремовый опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 1,98%-ного водного раствора Part B при 25 °C:

• pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,10–7,50.

Технические характеристики

Хранение

Сухой продукт следует хранить при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду хранят при 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Методические ссылки

Методика применения среды сформулирована с учётом рекомендаций BIS. В исходных данных приведена ссылка на проект ISO/DIS 8360-1:1988.